ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Geobacillus│pidamans 喜溫地芽孢桿菌Geobacillus│pidamans分離基物:堆肥斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no革蘭氏染色陽(yáng)性，細(xì)桿狀；菌落特征：不規(guī)則圓形，乳白色，表面平整，半透明,菌落扁平，表面濕潤(rùn)。50℃下生長(zhǎng)良好。33生長(zhǎng)條件:50℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：Rh 38.5-42.5%

Kitasatospora│viridis 綠色北里孢菌Kitasatospora│viridis分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no能于30℃解幾丁質(zhì)，酶活達(dá)到117.46U (1個(gè)酶活單位定義為：每毫升粗酶液反應(yīng)1時(shí)釋放1微克N—乙酰氨基葡萄糖的量)33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：Rh 38.5-42.5%

Streptomyces│laurentii 勞倫鏈霉菌Streptomyces│laurentii分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no能于30℃解幾丁質(zhì)，酶活達(dá)到126.79U (1個(gè)酶活單位定義為：每毫升粗酶液反應(yīng)1時(shí)釋放1微克N—乙酰氨基葡萄糖的量)培養(yǎng)方法生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：≥98%

Gordonia│alkanivorans 食戈登氏菌Gordonia│alkanivorans分離基物:污泥斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：≥98%

Rhodococcus│baikonurensis 拜科羅爾紅球菌Rhodococcus│baikonurensis分離基物:污泥斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：68-72 %

Virgibacillus│sp. 枝芽孢菌Virgibacillus│sp.分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no耐受10%的NaCl2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：Pt 44.5%

Staphylococcus│saprophyticus 腐生葡萄球菌Staphylococcus│saprophyticus分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no可以在含1000mg/l的綠磺隆無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中生長(zhǎng)2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：Pt 44.5%

Pseudomonas│veronii 威隆假單胞菌Pseudomonas│veronii分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no在M9培養(yǎng)基:中以嘧磺隆為氮源培養(yǎng)，6天內(nèi)降解率可達(dá)50%左右。A1生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法 純度：98%
MV人麻疹病毒ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理GPR109A/HM74A  G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體紅大戟3-溴-4-Human PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit

GRK1  G蛋白偶合受體激酶1抗體紅芪3-溴-4-Human FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit

GRK2/BARK1  G蛋白偶合受體激酶2抗體卷柏(墊狀卷柏）癸二銨Human VMA (Vanillylmandelic Acid) ELISA Kit

GRIM19  干擾素/維甲誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體麥芽癸二銨Human TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) ELISA Kit

GRM1  促代謝型谷氨受體1抗體花椒9-芐基咔唑Human PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit

GRM2/GLUR2  促代謝型谷氨受體2抗體蘆根3-甲基-5-并噻吩Human EPHA10 (Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit

Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876)  磷化促代謝型谷氨受體2抗體扶芳藤3-甲基-5-并噻吩Human ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit

Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr876)   磷化促代謝型谷氨受體2抗體伸筋草4-溴-2,5-二Human ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)