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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TIgG人免疫球蛋白GELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | IgG人免疫球蛋白GELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱(chēng) | Human Immunoglobulin G, IgG Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H64279 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
腫瘤/抗原26抗體英文全稱(chēng)Argininosuccinate Synthetase 1英文簡(jiǎn)稱(chēng)ASS1 檢測(cè)范圍:3044nmol/L-400U/L
腫瘤/抗原20抗體英文全稱(chēng)ELOVL5英文簡(jiǎn)稱(chēng)ELOVL5 檢測(cè)范圍:8806nmol/L-80ng/mL
腫瘤/抗原2.4抗體英文全稱(chēng)CA153英文簡(jiǎn)稱(chēng)CA153 檢測(cè)范圍:1115nmol/L-240U/ml
腫瘤/抗原2.3抗體英文全稱(chēng)β-microglobulin英文簡(jiǎn)稱(chēng)β-MG 檢測(cè)范圍:1114nmol/L-10μg/ml
腫瘤/抗原2.2抗體英文全稱(chēng)Soluble cytokine receptor英文簡(jiǎn)稱(chēng)sCKR 檢測(cè)范圍:1113nmol/L-2000pg/ml
腫瘤/抗原1B英文全稱(chēng)extractable nuclear antigen英文簡(jiǎn)稱(chēng)Extractable ANA 檢測(cè)范圍:1652nmol/L-
腫瘤/抗原1B/1A英文全稱(chēng)outer membrane protein A英文簡(jiǎn)稱(chēng)OmpA 檢測(cè)范圍:2130nmol/L-5000pg/mL
腫瘤/抗原13抗體英文全稱(chēng)cancer antigen 27-29英文簡(jiǎn)稱(chēng)CA27-29 檢測(cè)范圍:3049nmol/L-100U/mL
Leflunomide 規(guī)格:>98.5%,USP31,BR 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體
Leflunomide 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體
LevofloxacinHemihidrated 規(guī)格:>98.5%,USP34,BR,可用于培養(yǎng) BCL2樣15促凋亡蛋白抗體
LevofloxacinHemihidrated 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 BCL2相關(guān)X蛋白抗體
Lornoxicam 規(guī)格:>99% Bcl2樣凋亡蛋白9抗體
Lornoxicam 規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bcl2樣凋亡蛋白13抗體
LosartanPotassium 規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng) Bcl2樣凋亡蛋白14抗體
LosartanPotassium 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bcl2蛋白修飾因子抗體
Masitinib 規(guī)格:>98% 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體
脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 aibody,AT2R-Ab ELISA Kit
抗斑疹傷寒抗體(ai-typhus-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ai-typhus-Ab ELISA Kit
Ratisletcellaibody,ICA酶聯(lián)免疫試劑盒胰島抗體(ICA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MM酶聯(lián)免疫試劑盒糖原化酶同工酶MM(GP-MM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanKallikrein10,KLK10ELISAKit激肽釋放酶10(KLK10)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊過(guò)氧化氫酶(CAT)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Catalase,CAT ELISA kit
內(nèi)皮素1(ET-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit
Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TG酶聯(lián)免疫試劑盒β血板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanBromodeoxyuridine,BrdU酶聯(lián)免疫試劑盒溴脫氧核苷尿嘧(BrdU)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
IgG人免疫球蛋白GELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體10-(1-萘基)蒽-9-Porcine PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit
磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體2,4-二-5-硝基苯Porcine CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit
磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體2,4-二-5-硝基苯Porcine PRSS8 (Protease, Serine 8) ELISA Kit
遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體4-溴-3-(基)苯甲Porcine PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit
遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白樣抗體4-溴-3-(基)苯甲Porcine BCAN (Brevican) ELISA Kit
腺癌標(biāo)志物CHMP2A抗體5-硝基-8-羥基喹啉Porcine TM (Thrombin) ELISA Kit
染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體5-硝基-8-羥基喹啉Porcine PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit
染色質(zhì)修飾蛋白CHMP5抗體5-硝基-8-羥基喹啉Porcine KLK6 (Kallikrein 6) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
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