當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TCLA人抗膠原蛋白抗體ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | CLA人抗膠原蛋白抗體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Collagen autoantibody, CLA Elisa Kit |
貨號 | FS-H63497 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Sphingomonas│asaccharolytica 不解糖氨醇單胞菌Sphingomonas│asaccharolytica分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類、研究,具有生物肥料潛力。2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Dyadobacr│fermentans 發(fā)酵成對桿菌Dyadobacr│fermentans分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類、研究,具有生物肥料潛力。2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Bacillus│mucilaginosus 膠凍樣芽胞桿菌Bacillus│mucilaginosus分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類、研究,具有固氮生物肥料潛力。65生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%
Pseudomonas│mendocina 門多薩假單胞菌Pseudomonas│mendocina分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物模式菌株:no檢測、2生長條件:30-37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Delftia│sp. 代爾夫特菌Delftia│sp.分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類、研究,具有用作耐重金屬基因資源潛力。2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%
Pseudomonas│jessenii 杰氏假單胞菌Pseudomonas│jessenii分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類、研究,具有處理富營養(yǎng)體和養(yǎng)殖廢潛力。2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%
Bacillus│megarium 巨大芽胞桿菌Bacillus│megarium分離基物:蘇聯(lián)菌凍干物安全等級:1模式菌株:no分解有機(jī)磷,磷細(xì)菌肥料2生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:≥98%
Paenibacillus│sp. 類芽胞桿菌Paenibacillus│sp.分離基物:腐殖質(zhì)樣品斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no纖維素降解菌2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98%
CLA人抗膠原蛋白抗體ELISA試劑盒實驗原理intestinal FABP/IFABP 腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體亥茅酚苷(1R,2S)-2-[N-芐基-N-(均苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[非選擇性不對稱反應(yīng)用試劑]Human GAP (GTPase Activating Protein) ELISA Kit
FABP(brain) CT 腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體(C端)人參皂苷Rb2(1S,2R)-2-[N-芐基-N-(均苯基磺酰)氨基]-1-苯基酯[非選擇性不對稱反應(yīng)用試劑]Human GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit
FABPB 腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體1,5-O-二咖啡??鼘庪p(3,5-二基)氧化膦Human RGS4 (Regulator of G Protein Signaling 4) ELISA Kit
factor V 凝血因子5抗體白屈菜紅雙(3,5-二基)氧化膦Human HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit
factor VIII(FVIII) human 第八因子相關(guān)抗原抗體人參皂苷Rf三(硅基)硅烷Human H-Cadherin (Cadherin, Heart) ELISA Kit
factor VIII(FVIII) 第八因子相關(guān)抗原抗體木犀草苷三(硅基)硅烷Human NRG-4 (Neuregulin 4) ELISA Kit
factor XIII 凝血因子13抗體冬凌草甲素六釕銨Human FcaR (Fc Fragment of IgA Receptor) ELISA Kit
FADD Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白地膚子皂苷 Ic六釕銨Human PTPRK (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type K) ELISA Kit
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