產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：食管成纖維細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9793

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA試劑盒 英文名稱：Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒英文名稱：Human flagellin ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人纖維介蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人泛蛋白(Ub)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒英文名稱：Human orosomucoid,ORM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒英文名稱：Human Elastin,ELN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒英文名稱：Human Involucrin,iNV ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒英文名稱：Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人生長相關(guān)蛋白43(GAP-43)ELISA試劑盒英文名稱：Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒英文名稱：Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒英文名稱：Human Agrin ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒英文名稱：Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒 英文名稱：Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒英文名稱：Human elongin A,EloA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
食管成纖維細胞AUTS2  孤獨癥易感基因2蛋白抗體（自閉癥相關(guān)蛋白1）規(guī)格: 0.2ml

RABX5/Rabex5  G蛋白相關(guān)RABX5抗體規(guī)格: 0.2ml

PPAPDC3  磷脂磷2結(jié)構(gòu)域3抗體規(guī)格: 0.2ml

CCDC69  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體規(guī)格: 0.2ml

CCDC50  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體規(guī)格: 0.2ml

CCDC98  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體規(guī)格: 0.2ml

CCDC47  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體規(guī)格: 0.2ml

CCDC70  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體規(guī)格: 0.2ml