當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TAPF人抗核周因子抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | APF人抗核周因子抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human anti-perinuclear factor, APF Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63499 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Bacillus│mojavensis 摩加夫芽孢桿菌Bacillus│mojavensis分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:D,98%
Burkholderia│sp. 伯克霍爾德氏菌Burkholderia│sp.凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>95.0%(GC)
Arthrobacr│citreus 檸檬節(jié)桿菌Arthrobacr│citreus分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>95.0%(GC)
Clavibacr│michiganensis 密執(zhí)安棍狀桿菌Clavibacr│michiganensis分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:93%
Pseudomonas│trivialis 平凡假單胞菌Pseudomonas│trivialis分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:93%
Arthrobacr│aurescens 金黃節(jié)桿菌Arthrobacr│aurescens分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Arthrobacr│nitroguajacolicus 硝基癒瘡木膠節(jié)桿菌Arthrobacr│nitroguajacolicus分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Bacillus│vallismortis 死谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
APF人抗核周因子抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理FAF1 Fas相關(guān)1因子抗體6-羥基-7-甲氧基4-Human Ext-N (N-Terminal Extein) ELISA Kit
phospho-FAK (Ser732) 磷化粘著斑激酶抗體當(dāng)藥苷4-溴Human N-MID-OT (N-MID Osteocalcin) ELISA Kit
FAK2/Pyk2 富含脯氨的酪氨激酶2抗體正丁4-溴Human PTPRN (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit
phospho-Pyk2 (Tyr402) 磷化富含脯氨的酪氨激酶2抗體1-羥基-3,4,5-氧口山4-溴Human Ras-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit
phospho-Pyk2 (Tyr881) 磷化富含脯氨的酪氨激酶2抗體苦玄參苷 IA3-Human GAS (N-Acetylgalactosamine 6-Sulfatase) ELISA Kit
FANCD2 FANCD2抗體醋乙酯3-Human PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit
phospho-FANCD2(Ser222) 磷化FANCD2抗體20(S)-原人參二4-苯氧基乙Human P27 (P27 Protein) ELISA Kit
FANCF 范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體20(S)-人參皂苷Rh24-苯氧基乙Human TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit
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