當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TLKM人抗肝腎微粒體抗體ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | LKM人抗肝腎微粒體抗體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human liver kidney microsome autoantibody, LKM Elisa Kit |
貨號 | FS-H63501 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Paenibacillus│agaridevorans 食瓊脂類芽孢桿菌Paenibacillus│agaridevorans分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物模式菌株:noLB生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%
Rhizobium│etli 埃特*瘤菌Rhizobium│etli分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no476生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%
Micromonospora│auratinigra 金黑單胞菌Micromonospora│auratinigra分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:noGYM生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Sinorhizobium meliloti 苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium meliloti斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no3.48% NaCl生長與慶陽苜蓿共生固氮根瘤菌YMA培養(yǎng)基::KH2PO4 0.25 g,K2HPO4 0.25 g,MgSO4·7H2O 0.2 g,NaCl 0.1 g,酵母提取物 0.8 g,甘露醇 10.0 g,瓊脂 18.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.2,121℃,15min。生長條件:28-30℃,3-5天斜面培養(yǎng)存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Alcaligenes│xylosoxidans 木糖氧化產(chǎn)桿菌Alcaligenes│xylosoxidans分離基物:醫(yī)療用品凍干物安全等級:1模式菌株:no研究,2生長條件:33℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:from Penicillium brefeldianum, ≥98% (HPLC)
Bacillus│aquimaris 沙地芽孢桿菌Bacillus│aquimaris分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:no分類、研究,具有處理富營養(yǎng)體和養(yǎng)殖廢潛力。2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%
Macrococcus│caseolyticus 解酪蛋白巨大球菌Macrococcus│caseolyticus分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級:2模式菌株:no2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97%
Edwardsiella│tarda 遲鈍愛得華氏菌Edwardsiella│tarda分離基物:短鰭紅娘魚腸胃道斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no飼料用植酶等的篩選2生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
LKM人抗肝腎微粒體抗體ELISA試劑盒實驗原理Fc gamma RII a/CD32a 免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體吳茱萸Abacavir sulfateHuman RHOB (Ras Homolog Gene Family, Memmber B) ELISA Kit
FBN1 原纖維蛋白1抗體荊芥(R)-3-氨基-1-BOC-Human RCOR3 (Rest Corepressor 3) ELISA Kit
FDC-SP/ADC 濾泡樹突分泌蛋白抗體益母草(R)-3-氨基-1-BOC-Human RHOA (Ras Homolog Gene Family, Memmber A) ELISA Kit
Fe65 protein/APBB1 鐵蛋白Fe65抗體黃連(三角葉黃連)硫化錳Human Rock-2 (Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2) ELISA Kit
FGF1/AFGF 性成纖維生長因子抗體紫蘇葉硫化錳Human RND1 (Rho Family GTPase 1) ELISA Kit
FGF3/Oncogene INT2 纖維母生長因子3抗體檳榔硫化錳Human RUNX2 (Runt-Related Tranion Factor 2) ELISA Kit
FGF4 纖維母生長因子4抗體薄荷(1S,2S)-(+)-1,2-Cyclohexanediamino-N,N'-bis(3,5-di-t-butylsalicylidene)cobalt(II)Human COL9α3 (Collagen Type IX Alpha 3) ELISA Kit
FGF5 纖維母生長因子5抗體人參(1S,2S)-(+)-1,2-Cyclohexanediamino-N,N'-bis(3,5-di-t-butylsalicylidene)cobalt(II)Human S-100 (Soluble Protein-100) ELISA Kit
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