當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T羧酸酯酶ELISA試劑盒免費(fèi)包郵
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羧酸酯酶ELISA試劑盒免費(fèi)包郵 | Carboxylesterase | FS-P65804 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Anti-phospho-Syndecan 4(Ser179) 磷化多配體聚糖4(Ser179)抗體氘代鹽(5g )生長因子(GH)ELISA試劑盒
膽固25羥化酶抗體Anti-SYK 非受體型酪氨蛋白激酶抗體氘代鹽(5g )生長調(diào)節(jié)致癌因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒
天冬氨-胱氨特異性蛋白酶家族抗體Anti-Phospho-Syk (Tyr323) 磷化非受體型酪氨蛋白激酶抗體氘代鹽(10g)神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒
鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) 磷化非受體型酪氨蛋白激酶抗體氘代鹽(10g)前動(dòng)力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)ELISA試劑盒
鈣結(jié)合蛋白5/3抗體Anti-SYVN1 滑膜凋亡抑制物1抗體氘代鹽(50g)凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA試劑盒
CD98輕鏈抗體Anti-alpha-Synuclein(NT) 核突觸蛋白-α抗體(N端)氘代鹽(50g)苗條素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒
胰輔脂酶抗體Anti-Alpha-Synuclein 核突觸蛋白-α抗體氘代(5g)苗條素(OB)ELISA試劑盒
17號染色體開放閱讀框104抗體Anti-Alpha-Synuclein 核突觸蛋白抗體氘代(0.50 mL x 10 )苗條素(LEP)ELISA試劑盒
卡因和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體Anti-gamma Synuclein 核突觸蛋白-γ抗體氘代(0.5 mL x 10 )粒趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒
富半胱氨肝素結(jié)合蛋白61抗體Anti-Syntaxin 1 突觸融合蛋白1抗體氘代(0.6ml x 10)粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒
2號染色體開放閱讀框65抗體Anti-SYT3 突觸結(jié)合蛋白3抗體氘代(0.6ml x 10)可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒
β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體Anti-T3 三狀腺素T3抗體氘代(10g )可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒
陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1抗體Anti-Synapsin I 神經(jīng)突觸素1抗體氘代(10g )可溶性CD80(sCD80)ELISA試劑盒
DNA斷裂因子相似蛋白A抗體Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) 磷化神經(jīng)突觸素1抗體氘代(25g )巨集落激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒
DNA斷裂因子相似蛋白B抗體Anti-phospho-Synapsin I (Ser9) 磷化神經(jīng)突觸素1抗體氘代(25g )巨嗜趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒
羧酸酯酶ELISA試劑盒免費(fèi)包郵CD40L(Cluster of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit彎孢菌用途: 研究
CD80(T-lymphocyte activation antigen CD80) ELISA Kit匍匐曲霉原變種拉丁屬名: Aspergillus repens var. repens
CD56(Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit金橙黃微小桿菌拉丁屬名: Exiguobacterium aurantiacum
CD13(Aminopeptidase N) ELISA Kit芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
DLL1(Delta-like protein 1) ELISA Kit短波單胞菌屬拉丁屬名: Brevundimonas staleyi
E-Cad(E-Cadherin) ELISA Kit青春雙歧桿菌拉丁屬名: Bifidobacterium adolensentis
CRP(C-Reactive Protein) ELISA Kit匍枝根霉原變種拉丁屬名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer
CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
RAC1(Ras Related C3 Botulinum Toxin SubstRate 1) ELISA Kit藤黃淺藤黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces luteolutescens
EG-VEGF(Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) ELISA Kit雜色曲霉拉丁屬名: Aspergillus versicolor
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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