當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> KNS-81人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | AXB6381 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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產(chǎn)品名稱 | KNS-81人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 貨號 | AXB6381 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | KNS-81 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解素Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Pectinesterase 果膠酶抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 1ml
Rhesus aibody Rh HIV1 p55+p17/HIV1 Pr55Gag 艾滋病病毒抗體 規(guī)格 0.2ml
SLE(Human systemic lupus erythematosus) ELISA Kit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡 96T
PHF-tau 英文名稱: 成對螺旋細(xì)絲蛋白抗體 0.2ml
CTAG1B 英文名稱: /抗原1B 0.2ml
Ai-Pectinesterase 果膠酶抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 1ml
St-Ag(Human Salmonella typhi aigen) ELISA Kit 人傷寒抗原Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-phospho-IRS1(Tyr895) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh Leptin 瘦素抗體 規(guī)格 0.1ml
F-TESTO(Human Free Testoterone) ELISA Kit 人游離睪酮 96T
PHF8 英文名稱: 組蛋白賴酸去甲基化酶PHF8抗體 0.2ml
C1QC 英文名稱: 補體C1qγ鏈多肽抗體 0.2ml
Ai-phospho-IRS1(Tyr895) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Human Tetanus Aibody ELISA Kit 人破傷風(fēng)抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-KCNA5 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 規(guī)格 0.1ml
INH-B(Human inhibin B) ELISA Kit 人抑制素B 96T
PHF21A 英文名稱: PHD指蛋白21A抗體 0.2ml
CARKD 英文名稱: 碳水化合物激酶結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體 0.2ml
Ai-KCNA5 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
SAA3(Human serum amyloid A3) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A3Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
KNS-81人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞Ai-MK2/MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh KCNC3/Kv3.3 離子通道蛋白Kv3.3抗體 規(guī)格 0.2ml
CORT ELISA Kit 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮 96T
PHEX 英文名稱: D低0性佝僂病蛋白 0.2ml
CAPD2 英文名稱: 染色體相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
Ai-MK2/MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達(dá)效率。
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