當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T凝血因子ⅡELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
凝血因子ⅡELISA試劑盒 | coagulation factor Ⅱ | FS-P65635 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ADP核糖化樣因子ARL3抗體Anti-phospho-Bcl 10(Ser218) 磷化Bcl-10抗體咪唑司汀胰島素受體底物1(IRS1)ELISA試劑盒
花生四烯15脂氧合酶1抗體Anti-Bcl-2 Bcl-2抗體嗎替麥考酚酯/霉酚酯胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒
癌增強(qiáng)蛋白2抗體Anti-Phospho-Bcl-2 (Ser70) 磷化Bcl-2抗體嗎替麥考酚酯/霉酚酯(標(biāo)準(zhǔn)品)胰島素受體α(INSRA)ELISA試劑盒
α1微球蛋白抗體Anti-Phospho-Bcl-2 (Thr56) 磷化Bcl-2抗體奈拉濱胰島素生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)ELISA試劑盒
α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體Anti-Phospho-Bad(Ser112) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體醋奈西立肽胰島素生長因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)ELISA試劑盒
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體Anti-Phospho-Bad(Ser136) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體硫奈替米星胰島素抗體(Anti-Ins)ELISA試劑盒
AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體Anti-Phospho-Bad(Ser155) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體硫奈替米星(標(biāo)準(zhǔn)品)胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒
致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體Anti-Bcl-6/5 原癌因Bcl-6抗體制霉菌素胰島素(INS)ELISA試劑盒
腺苷脫氨酶抗體Anti-Bcl-10/CLAP Bcl-10抗體奧氮平胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒
含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體Anti-Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗體奧氮平(標(biāo)準(zhǔn)品)胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒
ATRNL1蛋白抗體Anti-BBC3/PUMA p53正向凋亡調(diào)控因子抗體鹽昂丹司瓊胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒
AFP4a蛋白抗體Anti-phospho-Bcl-xL(Ser62) 磷化Bcl-xL(pSer62)抗體鹽昂丹司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒
鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體Anti-BCHE (NT) 丁酰膽堿酯酶抗體(N端)奧硝唑衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒
鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體Anti-BCHE 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體奧硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體Anti-BCHE (CT) 丁酰膽堿酯酶抗體(C端)奧沙利鉑一氧化化氮(NO)ELISA試劑盒
凝血因子ⅡELISA試劑盒RABL2A ELISA Kit小串鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces catenulae
RABL2B ELISA Kit破傷風(fēng)試驗素注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
RABL3 ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
RAC2 ELISA Kit印度農(nóng)霉菌拉丁屬名: Agromyces indicus
RAD1 ELISA Kit塔賓曲霉拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
RACK1 ELISA Kit*松乳菇注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
RAD17 ELISA Kit烏飯樹擬莖點霉拉丁屬名: Phomopsis vaccinii Shear,
WNT5A(Protein Wnt-5a) ELISA Kit豇豆慢生根瘤菌用途: 與金合歡、黑荊相思樹共生固氮
RAD18 ELISA Kit阪崎腸桿菌拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
RAD23A ELISA Kit淡黃曲霉拉丁屬名: Aspergillus cremeus
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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