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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> KP-2人胰腺癌細(xì)胞
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號(hào) | AXB6385 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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產(chǎn)品名稱 | KP-2人胰腺癌細(xì)胞 | 貨號(hào) | AXB6385 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | KP-2 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長(zhǎng)期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長(zhǎng)期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Rabbit Ai-human sIgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
GST-Tag protein 重組S-轉(zhuǎn)移酶Multi-class aibodies規(guī)格: 0.5mg
c-Jun氨基末端激酶1/3抗體 Ai-JNK1/3 0.2ml
S100-A9 英文名稱: S100A9抗體 0.1ml
phospho-CD95 (Tyr232) 英文名稱: 0酸化載脂蛋白A1抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh phospho-PPAR alpha(Ser12) 0酸化α型-過氧化酶活化增生受體抗體 規(guī)格 0.1ml
GST-Tag protein 重組S-轉(zhuǎn)移酶Multi-class aibodies規(guī)格: 0.5mg
BFGF 小鼠堿性成纖維細(xì)胞因子Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-KGF/FGF7 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh Mouse Ai-Rabbit IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml
CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit 人細(xì)胞毒素 96T
phospho-c-Abl (Ser569) 英文名稱: 0酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
phospho-Cdc25B (Ser149) 英文名稱: 0酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
Ai-KGF/FGF7 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
P-GP(P-glycoprotein) P-糖蛋白抗原Multi-class aibodies規(guī)格: 0.5mg
Ai-Phospho-ATP1A1(Ser23) 0酸化ATP酶蛋白a1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh phospho-Alpha synuclein (Tyr125) 0酸化核突觸蛋白α抗體 規(guī)格 0.1ml
Neuron Specific Enolase 300 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Phospho-ATG1(Ser556) 英文名稱: 0酸化自噬相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
DDX19B 英文名稱: 解旋酶DEAD5抗體 0.1ml
Ai-Phospho-ATP1A1(Ser23) 0酸化ATP酶蛋白a1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
LIF 人白血病抑制因子Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Cripto-1 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Nitrotyrosine 硝基酪抗體 規(guī)格 0.2ml
Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 人胞漿免疫球蛋白 96T
phospho-ARP2 (Thr237) 英文名稱: 0酸化肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
CEB1 英文名稱: 胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CEB1抗體 0.1ml
Ai-Cripto-1 畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端)Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
LLO(Human listeriolysin O) ELISA Kit 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素OMulti-class aibodies規(guī)格: 48T
KP-2人胰腺癌細(xì)胞Ai-phospho-IRS1(Ser612) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh Leptin receptor/OB-R 瘦素受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Human Tri-iodothyronine ELISA Kit 人狀腺原酸 96T
phospho-AMPK beta 1 (Ser182) 英文名稱: 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗體 0.1ml
CPLX1 英文名稱: Complexin I/復(fù)合素1抗體 0.2ml
Ai-phospho-IRS1(Ser612) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長(zhǎng)滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
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