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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TCP人瘢痕性天皰瘡抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | CP人瘢痕性天皰瘡抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human cicatricial Pemphigoid, CP Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63570 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
Ulocladium│atrum 黑細(xì)基格孢Ulocladium│atrum斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Fusarium│oxysporum f. sp. cubense 尖鐮孢古巴化型(香蕉枯萎病菌)Fusarium│oxysporum f. sp. cubense斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:28℃ 純度:98%
Botryosphaeria│dothidea 葡萄座腔菌(蘋(píng)果干腐病菌)Botryosphaeria│dothidea斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Coniella│granati 顆粒墊殼孢(石榴干腐病菌)Coniella│granati斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Streptomyces│griseochromogenes 灰色產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│griseochromogenes分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)滅瘟素(miewensu)12生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Streptomyces│microaureus 金色鏈霉菌Streptomyces│microaureus分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生春雷霉素,防治稻稻瘟病12生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:93%
Actinoplanes│missourieneis 密蘇里游動(dòng)放線菌Actinoplanes│missourieneis分離基物:土壤表層5-10cm處斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no新霉素和弗氏菌素12生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Streptomyces│albidoflavus 微白黃鏈霉菌Streptomyces│albidoflavus斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1455生長(zhǎng)條件:26℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
CP人瘢痕性天皰瘡抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Phospho-Histone H3 (Ser10) 磷化組蛋白3抗體槐角3,4-二苯肼鹽鹽Human fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit
Phospho-Histone H3 (Ser28) 磷化組蛋白3抗體藤黃3,4-二苯肼鹽鹽Human rT3 (Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit
Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷化組蛋白3抗體八角麻2-巰基乙烷磺Human Ub (Ubiquitin) ELISA Kit
Phospho-Histone H3 (Thr3) 磷化組蛋白3抗體牛白藤2-巰基乙烷磺Human UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit
Histone H1 組蛋白H1抗體布渣葉Amiodarone hydrochlorideHuman DUB (Deubiquitinating Enzyme) ELISA Kit
phospho-Histone H1 (Thr146) 磷化組蛋白H1抗體松塔Amiodarone hydrochlorideHuman UBE1L (Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit
Acetylation-Histone H1b(Lys53) 乙?;M蛋白H1b抗體葶藶子(播娘蒿)(S)-(-)-二氨基烷 Human UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit
phospho-Histone H1.4 (Thr18) 磷化乙?;M蛋白H1b抗體百部(對(duì)葉百部)(S)-(-)-二氨基烷 Human UBE3A (Ubiquitin Protein Ligase E3A) ELISA Kit
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