ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體Anti-AQP4/FITC  熒光素標(biāo)記水通道蛋白-4蛋白抗體IgG二乙錫(標(biāo)準(zhǔn)品)延長(zhǎng)蛋白2(ELP2)ELISA試劑盒

半胱蛋白酶蛋白-6抗體（C端）Anti-AQP5/FITC  熒光素標(biāo)記水通道蛋白-5抗體IgG(標(biāo)準(zhǔn)品)延伸蛋白C(ELOC)ELISA試劑盒

周期素A2抗體Anti-AQP7/FITC  熒光素標(biāo)記水通道蛋白-7抗體IgG2,4'-滴滴涕(標(biāo)準(zhǔn)品)延伸蛋白B(ELOB)ELISA試劑盒

鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2α抗體Anti-AQP9/FITC  熒光素標(biāo)記水通道蛋白-9抗體IgG2,4′-DDT標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,體：異辛烷)延伸蛋白A3(ELOA3)ELISA試劑盒

鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2b/2γ抗體Anti-AR/FITC  熒光素標(biāo)記雄激素受體抗體IgG4,4'-滴滴涕(標(biāo)準(zhǔn)品)延伸蛋白A2(ELOA2)ELISA試劑盒

凋亡敏感性因抗體Anti-AKR1B1/ADR/FITC  熒光素標(biāo)記糖還原酶抗體IgG溴菊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)延胡索酶(FUM)ELISA試劑盒

天冬氨-胱氨特異性蛋白酶家族抗體Anti-phospho-AR ( p-Ser580)/FITC  熒光素標(biāo)記磷化雄激素受體抗體IgG溴菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,體：石油)延胡索二酰乙酰乙水解酶(FAH)ELISA試劑盒

半胱蛋白酶-10抗體Anti-AR(phospho Ser213/Ser791)/FITC  熒光素標(biāo)記磷化雄激素受體抗體IgG草萘(標(biāo)準(zhǔn)品)煙酰腺嘌呤二核苷磷(NAADP)ELISA試劑盒

半胱蛋白酶蛋白-12抗體Anti-AR Alpha1/FITC  熒光素標(biāo)記α1腎上腺素能受體抗體IgG除蟲(chóng)脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%，體：酮)煙受體1(NIACR1)ELISA試劑盒

半胱蛋白酶蛋白-13抗體Anti-ARC/FITC  熒光素標(biāo)記ARC抗體IgG除蟲(chóng)脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)煙堿型膽堿受體β3(CHRNβ3)ELISA試劑盒

CD10抗體Anti-ARF6/FITC  熒光素標(biāo)記ADP核糖化因子6抗體IgG2，4-滴(標(biāo)準(zhǔn)品)煙堿型膽堿受體β2(CHRNβ2)ELISA試劑盒

CD105抗體Anti-arfaptin 1/FITC  熒光素標(biāo)記ADP核糖化因子結(jié)合蛋白1抗體IgG2，4-滴(98%)煙堿型膽堿受體β1(CHRNβ1)ELISA試劑盒

干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體Anti-arfaptin 2/FITC  熒光素標(biāo)記ADP核糖化因子結(jié)合蛋白2抗體IgG二噻農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)煙堿型膽堿受體α7(CHRNα7)ELISA試劑盒

氯離子通道蛋白2抗體Anti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC  熒光素標(biāo)記磷化ADP核糖化因子結(jié)合蛋白2抗體IgG棉隆(標(biāo)準(zhǔn)品)煙堿型膽堿受體α5(CHRNα5)ELISA試劑盒

角蛋白5抗體Anti-ARHI/FITC  熒光素標(biāo)記ARHI蛋白抗體IgG雙氯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)煙堿型膽堿受體α4(CHRNα4)ELISA試劑盒
透明質(zhì)酸ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)Anti-APCS Antibody黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger

Anti-APEX1 Antibody大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

Anti-APCS Antibody大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia  coli

Anti-APEX1 Antibody(原貨號(hào)PB0097)路氏乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus reuteri

Anti-APCS Antibody黃微綠鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces flavovirens

Anti-APEX2 AntibodyMicrococcus yunnanensis注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-APLP1 Antibody灰黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces griseoflavus

Anti-APH1A Antibody葉點(diǎn)霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-APEX2 Antibody膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

Anti-API5 AntibodyMicrobacterium terricola注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)