商品介紹：

細(xì)胞凍存注意事項：
(1)  細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)ELISA試劑盒 ，英文名： TARDBP ELISA Kit

Mouse factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠可溶性P-選擇素(mouse sP-Selectin/sCD62P) 48T/96T 進(jìn)口分裝

48TIFVIgG/IFV-AIgG流感病毒AIgG(間接法二步法)ELISA試劑盒48T48T

通用型禽鼻氣6"}

小鼠羥甲基戊二酸單酰還原酶(HMG-CoAR)ELISA試劑盒 ，英文名： HMG-CoAR ELISA Kit

小鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA檢測試劑盒MouseImmunoglobulinM,IgMELISAKit 96T/48T

人富組蛋白(histatin-5)免疫試劑盒 Human histatin 5 ELISA Kit

RatIerleukin1α,IL-1αELISAKit大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CASPASE-8蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試6"}

兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒

Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒

HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織KSHV(KAPOSISARCOMA-A6"}

MH-22A小鼠肝癌22A細(xì)胞小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒

Human myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 人髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒

HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 人Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanArachidonicAcid,AAELISA試劑盒人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測試劑盒(包括萃取)20次

Humahyroidhormo6"}

操作步驟:

(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)

A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。