當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T血栓海綿蛋白ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
血栓海綿蛋白ELISA試劑盒 | Thrombospondin | FS-P66008 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
羥類固脫氫酶17β3抗體Anti-SRG2 /FITC 熒光素標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白相關(guān)因2抗體IgG性橙74封閉蛋白25(CLDN25)ELISA試劑盒
羥類固脫氫酶11β1抗體Anti-Synaptotagmin-4/FITC 熒光素標(biāo)記突觸結(jié)合蛋白4抗體IgG二酚橙封閉蛋白24(CLDN24)ELISA試劑盒
滋養(yǎng)層抗原3β-HSD抗體Anti-SRG5/SPATA12/FITC 熒光素標(biāo)記發(fā)生相關(guān)因5抗體IgG煌橙,藏花橙G封閉蛋白23(CLDN23)ELISA試劑盒
乙?;M蛋白H4抗體Anti-SRG11/Spata17/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡因抗體IgG靛紅(吲哚醌)封閉蛋白22(CLDN22)ELISA試劑盒
磷化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Anti-52KDa Ro/SSA /FITC 熒光素標(biāo)記核糖核蛋白抗原52kD-Ro/SSA抗體IgG新銅試劑(雙環(huán)己酮草酰二腙)封閉蛋白20(CLDN20)ELISA試劑盒
附睪分泌蛋白4抗體Anti-SSB/La /FITC 熒光素標(biāo)記抗干燥癥SSB/La抗體IgG奈比洛爾鹽鹽;奈必洛爾封閉蛋白2(CLDN2)ELISA試劑盒
三化組蛋白H3抗體Anti-Fut4/CD15/SSEA-1 /FITC 熒光素標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-1抗體IgG奈必洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)封閉蛋白19(CLDN19)ELISA試劑盒
三羥三輔酶A還原酶抗體Anti-SSEA3/FITC 熒光素標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-3抗體IgG核固紅封閉蛋白17(CLDN17)ELISA試劑盒
硫乙酰肝素蛋白多糖2Anti-SSEA4/FITC 熒光素標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-4IgG藏紅T,藏花紅T,番紅O封閉蛋白16(CLDN16)ELISA試劑盒
肝癌相關(guān)抗原hca25aAnti-AKAP12/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨抑制蛋白激酶C底物抗體IgG胭脂紅封閉蛋白15(CLDN15)ELISA試劑盒
己糖激酶3抗體Anti-SSTR1/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體1(SSTR1)抗體IgG溴酚紅封閉蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒
人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體Anti-SSTR2 /FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體2(SSTR2)抗體IgG麗春紅2R(BS)封閉蛋白12(CLDN12)ELISA試劑盒
人乙肝病pre S1蛋白抗體Anti-SSTR3/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體3(SSTR3)抗體IgG孟加拉玫瑰紅,性紅94封閉蛋白11(CLDN11)ELISA試劑盒
己糖激酶1抗體Anti-SSTR5/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體5(SSTR5)抗體IgG石炭品紅封閉蛋白10(CLDN10)ELISA試劑盒
己糖激酶2抗體Anti-SSTR4/FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體4(SSTR4)抗體IgG偶氮熒光桃紅,性紅1封閉蛋白1(CLDN1)ELISA試劑盒
血栓海綿蛋白ELISA試劑盒Anti-HSPG2 Antibody沉積物鹽坑微菌拉丁屬名: Salinimicrobium sediminis
Anti-HSPD1 Antibody(PB0301)紫麥角菌拉丁屬名: Claviceps purpurea
Anti-HSPH1 Antibody大豆慢生根瘤菌用途: 與大豆共生固氮良好。
Anti-HSPG2 Antibody(PB0302)食物芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cibi
Anti-HTR2A Antibody大腸埃希菌拉丁屬名: coli
Anti-HTR1A Antibody嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas maltophilia (ex Hugh and Ryschenkow 1961) Hugh 1981
Anti-HSPH1 Antibody蘇云金芽孢桿菌用途: 害蟲生物防治
Anti-HTR3A Antibody黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
Anti-HTRA3 Antibody大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Anti-HTR2B Antibody產(chǎn)氣莢膜梭菌 素C型拉丁屬名: perfringens Type C
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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