當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TUBD人泛素蛋白DELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | UBD人泛素蛋白DELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | human ubiquitin D, UBD Elisa Kit |
貨號 | FS-H64336 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
心肌病相關(guān)蛋白2英文全稱Gingipain K英文簡稱GK 檢測范圍:2379nmol/L-2000pg/mL
心動加速蛋白多肽抗體英文全稱SMAD-8英文簡稱SMAD-8 檢測范圍:2320nmol/L-10ng/mL
纈氨酰-tRNA合成酶抗體英文全稱NOD-2英文簡稱AFM 檢測范圍:1100nmol/L-800pg/ml
效應(yīng)蛋白酶受體1抗體英文全稱Blueberry shock virus英文簡稱BlShV 檢測范圍:3511nmol/L-
跨膜糖化蛋白抗體英文全稱Substance P英文簡稱SP 檢測范圍:8360nmol/L-200pg/ml
鼠增殖核抗原單克隆抗體英文全稱cholinesterase英文簡稱CHE 檢測范圍:7257nmol/L-800mU/mL
鼠血清白蛋白抗體英文全稱Staphylococcus英文簡稱Staphylococcus 檢測范圍:6388nmol/L-
鼠抗血紅蛋白單克隆抗體英文全稱PC12英文簡稱PC12 檢測范圍:5283nmol/L-8ng/mL
Lithiumlactate 規(guī)格:>98%,BR 磷化二氫嘧酶樣2抗體
Magnesiumcarbonatebasicpentahydrate 規(guī)格:>98%,BC 腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體
Manganesedioxide 規(guī)格:>97.5%,BC 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體
N,N'-Diphenylurea 規(guī)格:>98%,BR 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體
PEG600 規(guī)格:BR 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體
Prussianblue 規(guī)格:>98%,BS 大腦亮氨拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
PyroninB 規(guī)格:>30%,Ind Grade 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體
X-Galactosamidide 規(guī)格:分子生物學(xué)級 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體
Fucoxanthin 規(guī)格:BR,UV>30% 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5抗體
腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human VCAM-1 ELISA kit
抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: PM-Scl/PM-1 ELISA Kit
RatIerleukin3,IL-3酶聯(lián)免疫試劑盒白介素3(IL-3)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-Ab酶聯(lián)免疫試劑盒谷氨脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInvolucrin,iNVELISAKit套膜蛋白(iNV)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
犬5羥色(5-HT)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊β-脂蛋白(β-LP)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat beta-lipoopin,β-LP ELISA Kit
免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: λ-IgLC ELISA Kit
Ratandrogen酶聯(lián)免疫試劑盒雄激素(androgen)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCaspase-9,Casp-9酶聯(lián)免疫試劑盒胱天蛋白酶9(Casp-9)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKitD-乳脫氫酶(D-LDH)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
UBD人泛素蛋白DELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理角蛋白19抗體Porcine TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit
角蛋白2抗體Porcine GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) ELISA Kit
角蛋白4抗體Porcine CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit
色素b245輕鏈抗體Porcine GROα/CXCL1/NAP3 (Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit
5號染色體開放閱讀框44抗體Porcine ELA4 (Elastase 4) ELISA Kit
心臟特異性絲氨蛋白酶抗體Porcine FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit
胞漿型磷脂酶A2抗體Porcine CDK1 (Cyclin Dependent Kinase 1) ELISA Kit
周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體Porcine ES (Endostatin) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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