當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TPGDS人前列腺素D合成酶ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | PGDS人前列腺素D合成酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Prostaglandin D Synthase, PGDS Elisa Kit |
貨號 | FS-H63967 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
鈣黏蛋白18(CDH18) 規(guī)格:20mg 英文:Rubicon
鈣黏蛋白19(CDH19) 規(guī)格:20mg 英文:CSDE1
鈣黏蛋白20(CDH20) 規(guī)格:20mg 英文:Rock2
鈣黏蛋白22(CDH22) 規(guī)格:20mg 英文:RCBTB2
鈣黏蛋白23(CDH23) 規(guī)格:20mg 英文:PRDM10
鈣黏蛋白24(CDH24) 規(guī)格:20mg 英文:MOSC1
鈣黏蛋白26(CDH26) 規(guī)格:10mg 英文:MANSC1
鈣黏蛋白7(CDH7) 規(guī)格:20mg 英文:KAZALD1
鈣黏蛋白8(CDH8) 規(guī)格:20mg 英文:ZFYVE27
鈣黏蛋白9(CDH9) 規(guī)格:20mg 英文:ZFYVE26
鈉/氫交換因子1(NHE1) 規(guī)格:20mg 英文:ZFYVE16
鈉/鉀/鈣交換因子1(NCKX1) 規(guī)格:20mg 英文:CDCP1
鈉/鉀/鈣交換因子2(NCKX2) 規(guī)格:20mg 英文:ZBED3
鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶α1肽(ATP1α1) 規(guī)格:0.1g 英文:FNDC5
鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶α2肽(ATP1α2) 規(guī)格:0.1g 英文:TREH
Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate石英砂(AR,6-10目或2-3mm) 分子式:C8H8O4 純度:%
Mecobalamin石英砂(AR,8-16目或1-2mm) 分子式:C9H10O5 純度:98.0%
Terbinafine hydrochloride磷二氫銨(SP) 分子式:C19H20O4 純度:%
Domperidone二甲基亞砜(光譜級,>99.9% (GC)) 分子式:C27H22O6 性狀:Yellow powder 純度:97.0%
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazoleN,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC)) 分子式:C19H18O5 純度:98.0%
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol二甲基亞砜(ACS,光譜級) 分子式:C34H26O8 純度:97.5%
3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline乙二醇(光譜純 ,≥99%) 分子式:C19H18O5 純度:98.0%
3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal甘油(for spectroscopy,≥99.5%) 分子式:C16H22O2 純度:%
Pitavastatin ethyl ester碳鋰(SP) 分子式:C34H28O9 純度:97.5%
血幼素(HJV)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: HJV ELISA Kit
Duck IgG (aPT1/aPT2) ELISA Kit 鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)酶聯(lián)免疫試劑盒
Mousebasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit 性成纖維生長因子6(bFGF-6)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCollagenaseTypeIIELISAKit膠原酶II規(guī)格:48T/96T
CDK2/CYCLINA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitU-TSH高靈敏度促狀腺激素規(guī)格:48T/96T
β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit
色酰NA合成酶(WARS)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: WARS ELISA Kit
PorcineN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNP酶聯(lián)免疫試劑盒Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanAndrogenBindingProtein,ABP酶聯(lián)免疫試劑盒雄激素結(jié)合蛋白(ABP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISAKit核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
PGDS人前列腺素D合成酶ELISA試劑盒實驗原理CD229/SLAMF3/FITC 熒光素標記CD229抗體IgG人β亞基人絨毛膜促性腺激素(β HCG)抗體5-甲基-1,10-菲咯啉Rat IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC 熒光素標記CD244抗體IgG鈣激活通道蛋白 α 1抗體5,6-二甲基-1,10-菲咯啉Rat IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit
TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 熒光素標記腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體IgG鈣激活通道蛋白 α 1抗體5,6-二甲基-1,10-菲咯啉Rat IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit
CD272/BTLA/FITC 熒光素標記B和T淋巴衰減蛋白抗體IgG蛇巴曲酶抗體四Rat IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit
Cdc2 p34/FITC 熒光素標記周期素依賴性蛋白激酶p34抗體IgGBH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體四Rat IL-10 (Interleukin 10) ELISA Kit
Phospho-cdc2 (Thr14)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化周期素依賴激酶1抗體IgGBax抗體烯苯Rat ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
Phospho-cdc2 (Tyr15) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化周期素依賴激酶1抗體IgGBcl-2抗體烯苯Rat TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit
Cdc6/FITC 熒光素標記分裂周期蛋白6抗體IgG腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體4-羥甲Rat VEGF (Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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