當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>大鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TALP大鼠堿性磷酸酶ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ALP大鼠堿性磷酸酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat alkaline phosphatase, ALP Elisa Kit |
貨號 | FS-R64431 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體英文全稱filarial worm英文簡稱FW檢測范圍900nmol/L-
磷酸化Bcl-2抗體英文全稱Paragonimus英文簡稱PM檢測范圍901nmol/L-
磷酸化Bcl-xL蛋白抗體英文全稱flagellate英文簡稱FL檢測范圍902nmol/L-
神經(jīng)母細胞瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體英文全稱WNT3A英文簡稱WNT3A檢測范圍903nmol/L-800ng/ml
β晶體蛋白B1抗體英文全稱hypoxia-inducible factor 英文簡稱HIF檢測范圍904nmol/L-400pg/ml
β細胞素抗體英文全稱agouti gene-related protein英文簡稱AGRP檢測范圍905nmol/L-200ng/ml
磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體英文全稱High mobility group protein B1-IgG英文簡稱HMGB-1-IgG檢測范圍906nmol/L-1000ng/ml
ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體英文全稱High mobility group protein B1-IgM英文簡稱HMGB-1-IgM檢測范圍907nmol/L-800ng/ml
膽綠素還原酶抗體英文全稱High mobility group protein B1-IgA英文簡稱HMGB-1-IgA檢測范圍908nmol/L-640ng/ml
BIVM蛋白抗體英文全稱Anti ovary antibody英文簡稱Anti-OV Ab檢測范圍909nmol/L-800ng/ml
血型Lewis A抗原抗體英文全稱heparin-binding 英文簡稱HB檢測范圍910nmol/L-8ng/ml
粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體英文全稱Interleukin 1 Receptor英文簡稱IL-1R檢測范圍911nmol/L-640pg/mL
Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體英文全稱aminoacylase1英文簡稱ACY1檢測范圍912nmol/L-8ng/ml
骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體英文全稱Cluster of differentiation 90英文簡稱CD90檢測范圍913nmol/L-24ng/ml
磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體英文全稱Jagged1英文簡稱Jagged1檢測范圍914nmol/L-80ng/ml
磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體英文全稱Retinoic Acid英文簡稱RA1檢測范圍915nmol/L-
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II50 ml
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒Immunofluorescence Blocking Buffer100 ul
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒PAX3 Antibody100 ul
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)300 ul
大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒SignalSilence® UCHL1 siRNA II100 ul
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒CARD9 Antibody100 ul
大鼠高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒CK1δ Antibody100 ul
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒NLRC4 (D5Y8E) Rabbit mAb100 ul
ALP大鼠堿性磷酸酶ELISA試劑盒實驗原理磷化雷帕霉素靶蛋白抗體4,5-Dihydroblumenol A別名: 分子式: C13H22O3性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 大柱香波龍烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化粘著斑激酶抗體Isocalamendiol別名: 分子式: C15H26O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 菖蒲;杜松烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體Chlorantholide A別名: 2-Oxoeudesma-3,7(11),8-trien-12,8-olide分子式: C15H16O3性狀: Powder純度: 93.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 魚子蘭;桉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)Megastigm-7-ene-3,5,6,9-traol別名: 分子式: C13H24O4性狀: Oil純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 大柱香波龍烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)1,3,5-Cadinatriene-3,8-diol別名: Calamenene-3,7-diol分子式: C15H22O2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 杜松烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
濾泡樹突分泌蛋白抗體uclatriol別名: 4,6,10-Guaianetriol分子式: C15H28O3性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 愈創(chuàng)木烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
纖維母生長因子13抗體Macrocarpal K別名: 分子式: C28H40O6性狀: Yellow powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 桉屬;大果桉醛;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體Macrocarpal L別名: 分子式: C28H40O6性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 大果桉醛;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
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