當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>大鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TMT大鼠金屬硫蛋白ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | MT大鼠金屬硫蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Metallothionein, MT Elisa Kit |
貨號 | FS-R64423 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
雄激素受體抗體英文全稱Family with sequence similarity 19 member A4英文簡稱FAM19A4檢測范圍772nmol/L-8ng/mL
自分泌運動因子抗體英文全稱anti rubella virus IgG antibody英文簡稱anti-RV IgG檢測范圍773nmol/L-800mg/L
細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)英文全稱Apat-1英文簡稱Apat-1檢測范圍774nmol/L-24ng/ml
軸蛋白1抗體英文全稱Trypanosomacruzi英文簡稱Trypanosomacruzi檢測范圍775nmol/L-8ng/mL
膜粘連蛋白A1抗體英文全稱Protein Phosphatase 1, Catalytic Subunit Alpha Isoform英文簡稱PPP1Ca檢測范圍776nmol/L-24ng/mL
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體英文全稱Dickkopf 3英文簡稱DKK3檢測范圍777nmol/L-2000pg/ml
自噬相關(guān)蛋白1抗體英文全稱Cross Linked C-opeptide Of Type III Collagen英文簡稱CTXIII檢測范圍778nmol/L-32ng/ml
腺瘤肉調(diào)節(jié)蛋白抗體英文全稱5α-Dihydro testosterone英文簡稱5α-DHT檢測范圍779nmol/L-24nmol/L
銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體英文全稱Sex-determining region Y protein英文簡稱SRY檢測范圍780nmol/L-64ng/mL
AIMP2抗體英文全稱Hemorrhagic fever with renal syndrome antibody英文簡稱HFRS Ab檢測范圍781nmol/L-200ng/mL
乙酰膽堿酶抗體英文全稱rubella virus Antibody英文簡稱RV-Ab檢測范圍782nmol/L-800mg/L
水通道蛋白-7抗體英文全稱schistosoma Antibody英文簡稱SSA-Ab檢測范圍783nmol/L-
谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體英文全稱CD133英文簡稱CD133檢測范圍784nmol/L-800pg/mL
防御素α1/3抗體英文全稱Parkin protein英文簡稱PP檢測范圍785nmol/L-24ng/mL
ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體英文全稱Staphylococcal Enterotoxin C英文簡稱SEC檢測范圍786nmol/L-20ng/mL
炭疽素受體2抗體英文全稱Staphylococcal Enterotoxin E英文簡稱SEE檢測范圍787nmol/L-20ng/mL
病性神經(jīng)壞死癥(VNN))核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)R1 (D2B6N) XP® Rabbit mAb1 ml
河弧菌(VF)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)Protein A (HRP Conjugate)100 ul
沙門氏菌(SPP)核酸檢測試劑盒(PCR法)TEAD1 (D9X2L) Rabbit mAb100 ul
志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒(PCR法)ATP2A1/SERCA1 (D54G12) Rabbit mAb100 ul
金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測試劑盒(PCR法)CUEDC2 Antibody100 ul
艱難梭菌(TCD-A)核酸檢測試劑盒(PCR法)FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb20 ul
艱難梭菌(TCD-B)核酸檢測試劑盒(PCR法)FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb100 ul
諾如病(NV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)PKR (D7F7) Rabbit mAb1 Kit
MT大鼠金屬硫蛋白ELISA試劑盒實驗原理磷化雌激素受體α抗體Germacrone別名: 分子式: C15H22O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗菌;抗真菌;吉瑪烷;吉馬烷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化真核翻譯起始因子4B抗體Megastigm-7-ene-3,4,6,9-trol別名: 分子式: C13H24O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 大柱香波龍烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
真核翻譯起始因子4B抗體Torilin別名: 分子式: C22H32O5性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗血管生成;抗炎;竊衣屬;愈創(chuàng)木烷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體Abscisic acid別名: 分子式: C15H20O4性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Curzerenone別名: 分子式: C15H18O2性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化真核翻譯起始因子4G抗體Heliangin別名: 分子式: C20H26O6性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
表皮生長因子受體5抗體Atractylenolide I別名: 分子式: C15H18O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體Epiguajadial B別名: 分子式: C30H34O5性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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