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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TBCGF人B細(xì)胞生長因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | BCGF人B細(xì)胞生長因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human B cell growth protein, BCGF Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63227 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Candida albicansCMCC 98001 白色念珠菌Candida albicansCMCC 98001模式菌株:未知0.5~1.0×10³cfu/顆 1顆/支 純度:96%
Acetobacr│sp. 醋桿菌屬Acetobacr│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)醋。CM0001生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%
Morchella sp. 羊肚菌屬(斜面)Morchella sp.斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no研究;。食用。綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:25℃,好氧。生長特性8天長滿斜面,菌絲灰白色、稀疏。存儲(chǔ)條件:2-8℃冷藏 純度:98%
Clostridium│swellfunianum sp. nov. 井坊梭菌Clostridium│swellfunianum sp. nov.分離基物:窖泥凍干物安全等級(jí):1產(chǎn)、乙醇、己、氫氣、二氧化碳;降解乳。CM0999生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:其他 純度:Standard for GC,≥99.5%(GC)
Streptococcus pyogenes 釀膿鏈球菌Streptococcus pyogenes分離基物:患有流行性咽炎的兒童咽部凍干安全等級(jí):1模式菌株:no質(zhì)控菌株。1、哥倫比亞血平板(成品) 2、腦心浸提液瓊脂(BHI):心提取物 5.0g,腦提取物 12.5g,月示胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.4。生長條件:37℃,5%CO2 純度:98%
Lactobacillus leichmannii 萊氏曼氏乳桿菌Lactobacillus leichmannii凍干安全等級(jí):1模式菌株:no用于維生素B12鈷胺素,鈷胺素測(cè)定法,食品檢測(cè),制藥和個(gè)人護(hù)理MRS培養(yǎng)基::酪胨 10.0g,牛肉 8.0g,酵母 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,鈉 5.0 g,檸檬三銨 2.0 g,磷氫二鉀 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,微好氧或厭氧 純度:98%
Streptomyces avidinii 親和素鏈霉菌Streptomyces avidinii分離基物:土壤凍干安全等級(jí):1模式菌株:;產(chǎn)生抗生素MSD-235ISP-2培養(yǎng)基::酵母提取物 4.0 g,麥芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH7.3。121℃,15分鐘滅菌。生長條件:28℃,好氧 純度:≥99%
Mortierella sp. 被孢霉屬(斜面)Mortierella sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no:食用。綜合PDA瓊脂:馬鈴薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,維生素B1 微量,瓊脂 15.0g,pH6.0。[注] 馬鈴薯提取液:取去皮馬鈴薯200g,切成塊,加1.0L煮沸30min,濾去馬鈴薯塊,將濾液補(bǔ)足至1.0L。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:25℃,好氧生長特性8天長滿斜面,菌絲潔白、濃密、整齊。存儲(chǔ)條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個(gè)月。 純度:≥99%
BCGF人B細(xì)胞生長因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Schaedler瓊脂人卵巢表層上皮腸血管內(nèi)皮Aromatase 芳香化酶(抗原)
M17肉湯人卵巢成纖維腸隱窩上皮SP-C peptide 肺表面活性蛋白C抗原
M17瓊脂人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)胃粘膜上皮Mast Cell Chymase 肥大類糜蛋白酶1
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)肝竇內(nèi)皮Ceruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原
改良麥康凱肉湯基礎(chǔ)(CT-MAC)人骨髓間充質(zhì)干腎實(shí)質(zhì)CKLF1 趨化素樣蛋白
改良MC培養(yǎng)基人脂肪間充質(zhì)干腎系膜ART(Artemin)(抗原)
TTC營養(yǎng)瓊脂人肝臟間充質(zhì)干膀胱上皮AATK peptide 凋亡關(guān)聯(lián)酪氨激酶抗原
LB肉湯人臍帶間充質(zhì)干膀胱平滑肌AQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)
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