ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Aspergillus│usamii var. 宇佐美曲霉變種Aspergillus│usamii var.凍干物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0015生長條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Lactobacillus│buchneri 布氏乳桿菌Lactobacillus│buchneri分離基物:青貯飼料凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no制作青貯飼料。CM0006生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Lactobacillus│sp. 乳桿菌屬Lactobacillus│sp.分離基物:馬奶凍干物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0006生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Streptococcus│sp. 鏈球菌屬Streptococcus│sp.分離基物:稀奶油凍干物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0005生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Lactococcus│garvieae 格氏乳球菌Lactococcus│garvieae分離基物:成熟奶凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no發(fā)酵奶CM0005生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：97%

Lactococcus│lactis subsp. cremoris 乳乳球菌乳脂亞種Lactococcus│lactis subsp. cremoris分離基物:開菲爾粒凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no開菲爾發(fā)酵劑CM0005生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：97%

Candida│guilliermondii 季也蒙假絲酵母Candida│guilliermondii凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no用于白酒釀造研究。CM0077生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：97%

Hansenula│anomala var. anomala 異常漢遜酵母異常變種Hansenula│anomala var. anomala凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no用于清香型白酒的釀造研究。CM0077生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：≥99.99% metals basis
ESF人紅細(xì)胞刺激因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理酵母葡萄糖霉素瓊脂（YDC）人心臟成纖維肺微血管內(nèi)皮Annexin Ⅲ peptide  膜粘連蛋白A3抗體

CVT瓊脂培養(yǎng)基人心臟成纖維-心室肺血管平滑肌TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2)  金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)

麥康凱肌阿東羧芐青霉素瓊脂基礎(chǔ)（MIAC）人心臟成纖維-心房II型肺泡上皮TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3)  金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)

腸球菌瓊脂（膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂）人角膜上皮氣管上皮Proinsulin  胰島素原

腸球菌肉湯人角膜氣道平滑肌ADM R, Adrenomedullin receptor  腎上腺髓質(zhì)素受體（抗原）

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基人視網(wǎng)膜內(nèi)皮肺成纖維PAI-1  纖溶酶原激活物抑制因子

膽汁七葉苷瓊脂(BEA)人視網(wǎng)膜色素上皮支氣管上皮CK7  角蛋白7

濾膜腸球菌瓊脂人晶狀體上皮支氣管成纖維VTG(vilogenin)  青鳉魚卵黃蛋白
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)