ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Eupenicillium│parvum 微細(xì)正青霉Eupenicillium│parvum分離基物:土壤凍干物安全等級:1CM0072生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Talaromyces│ruber 紅色籃狀菌Talaromyces│ruber分離基物:植物塊根凍干物安全等級:1分類學(xué)研究。CM0077生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Eupenicillium│ochrosalmoneum 赭鮭色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum分離基物:玉米凍干物安全等級:1CM0072生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Salmonella│enrica subsp. enrica 腸沙門氏菌腸亞種Salmonella│enrica subsp. enrica凍干物安全等級:2模式菌株:no研究、質(zhì)量控制CM0002生長條件:36℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Morganella morganii 摩氏摩根氏菌Morganella morganii凍干物安全等級:1模式菌株:no研究、質(zhì)量控制營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃，好氧，24h。存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth 腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth凍干物安全等級:2模式菌株:no研究、質(zhì)量控制CM0002生長條件:36℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：99%

Tuberibacillus│calidus 熱生腫塊芽孢桿菌Tuberibacillus│calidus分離基物:堆肥凍干物安全等級:1CM0998生長條件:50℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Bifidobacrium│bifidum 兩歧雙歧桿菌Bifidobacrium│bifidum分離基物:成年人腸道凍干物安全等級:1模式菌株:no用于益生菌類食品。CM0791生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%
CR2/sCD21人可溶性CD2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理葉測定培養(yǎng)基人肺成纖維肝內(nèi)膽管上皮ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22)  ?？窠?jīng)素（35肽）

泛測定培養(yǎng)基人支氣管平滑肌胃黏膜上皮ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22)  海葵神經(jīng)素（35肽）

游離生物素測定培養(yǎng)基人氣管平滑肌腎實(shí)質(zhì)ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9)  ?？窠?jīng)素（35肽）

肌測定培養(yǎng)基人支氣管成纖維腎系膜ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11)  海葵神經(jīng)素（35肽）

多價(jià)蛋白胨酵母膏（PY）培養(yǎng)基人骨骼肌膀胱上皮rHBcAg  重組乙肝病核心抗原

營養(yǎng)肉湯（不含糖）人骨骼肌衛(wèi)星膀胱平滑肌rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein)  重組乙肝病e抗原

亮綠乳糖培養(yǎng)基（BGL）人骨骼肌成肌腎動(dòng)脈內(nèi)皮rDen(rh-Dengue Virus)  多價(jià)重組人登革熱病診斷抗原

腸道菌增菌肉湯(EE)人腎上腺皮質(zhì)腎動(dòng)脈平滑肌rDen-2(rh-Dengue Virus)  重組人登革熱病2型診斷抗原
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)