當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TKim-1人腎損傷分子ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | Kim-1人腎損傷分子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Kidney injury molecule 1, Kim-1 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63987 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ISLLIM同源框蛋白1(ISL1) 規(guī)格:0.5g 英文:CA199
Isthmin1蛋白(ISM1) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:CA125
Isthmin2蛋白(ISM2) 規(guī)格:HPLC≥95%,20mg/支 英文:GlyCAM-1
Jagged1蛋白(JAG1) 規(guī)格:5mg/支 英文:A1c
Jagged1蛋白(JAG1) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:HbA1C
Jagged2蛋白(JAG2) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:Gly-LDL
Janus激酶1(JAK1) 規(guī)格:HPLC≥97%,20mg/支 英文:GSP
Janus激酶2(JAK2) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:GA
Janus激酶2(JAK2) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:Gp49a
Janus激酶3(JAK3) 規(guī)格:HPLC≥99%,20mg/支 英文:gp130
Janus激酶3(JAK3) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:GAG
JunB原癌基因(JUNB) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:PC
Juxtanodin蛋白(JN) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:CBR1/CBR/CRN
Kaptin蛋白(KPTN) 規(guī)格:HPLC≥98%,10mg/支; 英文:CA9
Kazrin蛋白(KAZN) 規(guī)格:HPLC≥98%,20mg/支 英文:CA-6
Euhorbiasteroid4-差向土霉素 分子式:C15H18O3 性狀:Powder 純度:%
Songorine6α-羥基紫杉醇 分子式:C14H26O4 性狀:Powder 純度:%
Kalopanaxsaponin H2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)紫杉醇 分子式:C36H42O10 性狀:Powder 純度:95.0%
3-isomangostin3'-對羥基紫杉醇 分子式:C15H26O2 性狀:Powder 純度:99.0%
Grosvenorine紫杉醇-d5 分子式:C15H18O5 性狀:Powder 純度:97.5%
8-methyl Chrysophanol7-差向紫杉酚 分子式:C15H24O4 性狀:Powder 純度:%
diosgenin-3-O-β-D-xylosyl-(1→3)-β-glucoside紫杉醇C 分子式:C17H28O3 性狀:Powder 純度:98.0%
6-Hydroxykaempferol-3,6,7-triglucoside2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-6α-羥基-7-差向-紫衫醇 分子式:C15H22O4 性狀:Powder 純度:98.0%
Berberine SulfateN-Debenzoyl-7-{[(2,2,2,-trichloroethyl)oxy]carbonyl}紫杉醇 分子式:C15H18O4 性狀:Powder 純度:98.0%
氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: OLAb ELISA Kit
α1微球蛋白(α1-MG)ELISA檢測試劑盒Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 96T/48T
Toll樣受體7(TLR-7)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat toll-like receptor 7,TLR-7 ELISA Kit
CLIAKitforsRANKLELISAKit可溶性核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96T
血液載脂蛋白A1(APOLIPOPROTEINA1)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitAgrin聚集蛋白規(guī)格:48T/96T
β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
催乳素(PRL/LTH)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Prolactin/Leoopic Hormone,PRL/LTH ELISA Kit
乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: LF/LTF ELISA Kit
PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-A酶聯(lián)免疫試劑盒肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠa酶聯(lián)免疫試劑盒血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgⅠa)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,AT-DⅣELISAKit抗鈣蛋白酶抑素抗體(AT-DⅣ)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Kim-1人腎損傷分子ELISA試劑盒實驗原理ocludin-5/FITC 熒光素標記緊密連接蛋白-5抗體IgG磷化B-Raf抗體L-天門冬氨-4-叔丁基酯Rat CR (Calretinin) ELISA Kit
CLDN3/Claudin 3/FITC 熒光素標記緊密連接蛋白3抗體IgG磷化B-Raf抗體L-天門冬氨-4-叔丁基酯Rat CALU (Calumenin) ELISA Kit
CLDN4/Claudin 4/FITC 熒光素標記緊密連接蛋白4抗體IgG磷化B-Raf抗體N6-苯甲?;?脫氧腺苷Rat CDT (Carbohydrate-Deficient Transferrin) ELISA Kit
CLDN5/FITC 熒光素標記緊密連接蛋白5抗體IgG磷化B-Raf抗體對苯Rat CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit
CLEC-1/CLEC1A/FITC 熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體IgG轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白BACH2抗體對苯Rat CA2 (Carbonic Anhydrase II) ELISA Kit
CLEC-2/CLEC1B/FITC 熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體IgG炭疽桿菌致死因子LF抗體優(yōu)降寧Rat PICP (Carboxyterminal Propeptide of Type I Procollagen) ELISA Kit
CLEC2D/OCIL/FITC 熒光素標記CLEC2D蛋白抗體IgG蛋白BOC抗體優(yōu)降寧Rat CEA (Carcinoembryonic Antigen) ELISA Kit
CLEC5A/MDL1/FITC 熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體IgG氨肽酶A抗體(S)-(-)-1,2-環(huán)氧丁烷Rat c/TNNT2 (Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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