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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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EGF人表皮生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)48T/96T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-05-14 13:13:37瀏覽次數(shù):135次

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EGF人表皮生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理產(chǎn)品特點(diǎn):是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢。

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等

產(chǎn)品名稱

EGF人表皮生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

英文名稱

Human Epidermal growth factor, EGF Elisa Kit

貨號(hào)

FS-H63252

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
Pachysolen tannophilus 嗜鞣管囊酵母Pachysolen tannophilus凍干物,斜面安全等級(jí):1釀造酒精;利用戊碳糖。酵母膏 3.0g,麥芽浸膏 3.0g,蛋白胨 5.0g,葡萄糖 10.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾 1.0L。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長(zhǎng)條件:24℃,好氧存儲(chǔ)條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個(gè)月。 純度:98%

Escherichia coli SC 志賀性大腸埃希氏菌Escherichia coli SC分離基物:腹瀉病例糞便標(biāo)本凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:37℃,好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Lichtheimia│ramosa 總狀橫梗霉Lichtheimia│ramosa斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no釀造黃酒。CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97%

Corynebacrium ammoniagenes 產(chǎn)氨棒桿菌Corynebacrium ammoniagenes凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no研究;。發(fā)酵法三磷腺苷(ATP)。普通瓊脂:牛肉浸液 1.0L,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂20.0~25.0g,pH7.2~7.4。[注] 牛肉浸液的制備:瘦牛肉洗凈,切碎,稱取550克浸泡于1375ml中,浸泡一夜,過(guò)濾,濾液分裝后0.6kg/cm2滅菌40min后備用。生長(zhǎng)條件:28-30℃。好氧。生長(zhǎng)特性G+,抗染色陰性,菌體短桿狀,單個(gè)排列,兩端圓形,無(wú)芽胞,無(wú)莢膜,不運(yùn)動(dòng)。菌落圓形,表面光滑,稍凸起,邊緣整齊,灰白色,有光澤。培養(yǎng)液混濁,無(wú)氣味,無(wú)沉落物。不液化明膠。發(fā)酵葡萄糖、果糖和麥芽糖。葡萄糖發(fā)酵型,V.P陰性,M.R.陰性,不解淀,不分解纖維素,吲哚反應(yīng)陰性,不產(chǎn)H2S,脲酶陽(yáng)性,接觸酶陽(yáng)性,兼性厭氧。高生長(zhǎng)溫度42℃。石蕊牛奶反應(yīng)性,利用硝鹽。發(fā)酵三磷腺苷(ATP)的產(chǎn)量為2-3 g/L。存儲(chǔ)條件:2-8℃真空冷凍干燥法 純度:97%

Bacillus subtilis subsp. subtilis 枯草芽胞桿菌枯草亞種Bacillus subtilis subsp. subtilis凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no用于提取聚谷氨。LB,哥倫比亞血平板,好氧生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Klebsiella rrigena 土生克雷伯氏菌Klebsiella rrigena分離基物:活性污泥凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no環(huán)境污處理NB生長(zhǎng)條件:37℃,好氧,24h,陰性桿菌,純存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Salmonella saintpaul 圣堡羅沙門氏菌Salmonella saintpaul分離基物:進(jìn)口凍火雞二節(jié)翼凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no研究、質(zhì)量控制營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂培養(yǎng)基::蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:36℃,好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%

Salmonella agona 阿貢納沙門氏菌Salmonella agona分離基物:凍雞分割品凍干安全等級(jí):2模式菌株:no研究、質(zhì)量控制。營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂培養(yǎng)基::蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:37℃,好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:≥98%
EGF人表皮生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理玫瑰紅鈉瓊脂角質(zhì)生長(zhǎng)添加物腎上皮Nestin  巢蛋白(神經(jīng)上皮干蛋白)(抗原)

0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基角質(zhì)生長(zhǎng)添加物(不含BPE)輸尿管上皮AR Alpha1( Alpha1-adrenergic receptor)  α1腎上腺素能受體抗原

肉湯瓊脂培養(yǎng)基角質(zhì)生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)腎實(shí)質(zhì)Apelin36  脂肪炎癥因子Apelin36

普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2)黑色素生長(zhǎng)生長(zhǎng)添加物腎系膜Nestin  巢蛋白(神經(jīng)上皮干蛋白)(抗原)

甘露瓊脂培養(yǎng)基黑色素生長(zhǎng)添加物(不含TPA)膀胱上皮ASCL1/MASH1(Achaete-scute homolog 1)  神經(jīng)母特異性轉(zhuǎn)移因子抗原

酪胨瓊脂成纖維生長(zhǎng)添加物膀胱平滑肌ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1)  p53凋亡激蛋白1抗原

葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基成纖維生長(zhǎng)添加物-2腎動(dòng)脈內(nèi)皮ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2)  P53凋亡激蛋白2抗原

抗生素檢定培養(yǎng)基4號(hào)成纖維生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)腎動(dòng)脈平滑肌neurofasciu-155  神經(jīng)束蛋白-155

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