產品屬于：

產品名稱：腎周細胞    

產品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9826

產品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠c-fos ELISA試劑盒英文名稱：Rat c-fos ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠c-jun ELISA試劑盒 英文名稱：Rat c-jun ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠可溶性白介6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒英文名稱：Rat soluble Interleukin 6 receptor,sIL-6R ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Pyridinoline,PYD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)ELISA試劑盒英文名稱：Rat beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠骨堿性磷(BALP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠凝聚(CLU)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Clusterin,CLU ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠轉化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒英文名稱：Rat transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠白介32(IL-32)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠孕受體(PROGR)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠白介21(IL-21)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat Interleukin 21,IL-21 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠D-乳脫氫(D-LDH)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠胸腺活化調節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒英文名稱：Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠膽固(CH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat cholesterol,CH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Triglyceride,TG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat low density lipoprotein,LDL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒英文名稱：Rat High density lipoprotein,HDL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

大鼠孕受體(PGR)ELISA試劑盒 英文名稱：Rat progesterone receptor,PGR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
腎周細胞MC3 Receptor  黑皮質受體3抗體規(guī)格: 0.2ml

PDGF AB+BB  血小板源性生長因子AB+BB抗體規(guī)格: 0.2ml

CPLA2  胞漿型磷脂A2抗體規(guī)格: 0.2ml

TIRAP  白細胞介1受體銜接蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-TIRAP(Tyr86)  磷化白細胞介1受體銜接蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

TNIP2/ABIN2/TNFAIP3 interacting protein 2  腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37  肝結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺抗體規(guī)格: 0.2ml

AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2  α1性糖蛋白2抗體（類粘蛋白2）規(guī)格: 0.2ml