當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T乙酰肝素酶撫生ELISA試劑盒
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乙酰肝素酶撫生ELISA試劑盒 | Heparanase | FS-P66074 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷化蛋白酪氨激酶JAK-2抗體H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病M2型(抗原)β-乙Paralemmin2蛋白(PALM2)ELISA試劑盒
凋亡清除受體抗體HCV-Core 型肝炎病-C區(qū)(多肽)亮菌素Paralemmin蛋白(PALM)ELISA試劑盒
磷化原癌因c-Jun抗體HCV-NS1 型肝炎病-NS1(抗原)17α-羥烯酮Papilin蛋白(PAPLN)ELISA試劑盒
Notch配體Jagged 2蛋白抗體HCV-NS3 型肝炎病-NS3(抗原)21-乙酰氧孕烯酮Pannexin3蛋白(PANX3)ELISA試劑盒
組蛋白去化Jarid1C抗體HCV-NS4a 型肝炎病-NS4a(抗原)珊瑚菜內(nèi)酯,珊瑚菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)Pannexin2蛋白(PANX2)ELISA試劑盒
組蛋白去轉(zhuǎn)移酶JMJD1B抗體HEV 戊型肝炎?。乖坊?標(biāo)準(zhǔn)品)Pannexin1蛋白(PANX1)ELISA試劑盒
親聯(lián)蛋白2抗體HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病(抗原)右旋延胡索乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)Palmdelphin蛋白(PALMD)ELISA試劑盒
驅(qū)動蛋白家族蛋白13B抗體HisX6 聚組氨標(biāo)簽蛋白對溴芐 Paladin蛋白(PALD)ELISA試劑盒
驅(qū)動蛋白家族蛋白7抗體HIV-1(gp41) 艾滋病?。乖╈`芝烯Bp53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)ELISA試劑盒
CREB結(jié)合蛋白抗體HIV gp120 艾滋病?。乖┭雍饕宜?;消旋延胡索乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)p21蛋白激活激酶4(PAK4)ELISA試劑盒
腦蛋白9抗體HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60(抗原)延胡索乙素;消旋延胡索乙素O-巖藻糖肽3-β-N-乙酰氨葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(RFNG)ELISA試劑盒
絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原)孕烯酮醋酯,孕烯諾龍乙酯O-唾液糖蛋白內(nèi)肽酶(OSGEP)ELISA試劑盒
鋅指蛋白393抗體alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原孕烯酮醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Otubain2蛋白(OTUB2)ELISA試劑盒
組蛋白賴氨特異性脫酶1抗體ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酶抑制劑(抗原)殼聚糖(M.W70w-100w)Otubain1蛋白(OTUB1)ELISA試劑盒
驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體(狀腺激素受體相互作用蛋白5)IDE, (Insulin degradation enzyme) 胰島素降解酶(抗原)殼聚糖(M.W.10萬)Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒
乙酰肝素酶撫生ELISA試劑盒Anti-MMP10 Antibody橄欖假絲酵母拉丁屬名: Candida oleophila
Anti-MMP10 Antibody金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)拉丁屬名: Flammulina velutipes
Anti-MMP12 Antibody迂回殼囊孢菌用途: 植物病原物,為該病防治提供依據(jù)
Anti-MMP13 Antibody米黃絲膜菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-MMP12 Antibody慢生根瘤菌用途: 與胡枝子共生固氮
Anti-MMP13 Antibody北里胞菌拉丁屬名: Kitasatosporia sp.
Anti-MMP13 Antibody摩加夫芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus mojavensis
Anti-MMP13 Antibody枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus simplex
Anti-MMP14 Antibody小孢根霉須狀變種拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis
Anti-MMP15 Antibody紫蓋蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
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