當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TCSF人集落刺激因子ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | CSF人集落刺激因子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human colony-stimulating factor, CSF Elisa Kit |
貨號 | FS-H63237 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Fusobacrium nucleatum subsp nucleatum 具核梭桿菌聚核亞種Fusobacrium nucleatum subsp nucleatum凍干安全等級:1模式菌株:no哥倫比亞血平板(成品)生長條件:37℃,厭氧,24-48h 純度:≥99%
Bacillus pasurii 巴氏芽孢桿菌Bacillus pasurii凍干安全等級:1模式菌株:noO +20g/L尿素:蛋白胨 5.0 g,牛肉浸膏 3.0 g , 尿素 20.0 g ,蒸餾 1.0 L,pH 7.3 。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98%
Clostridium difficile 艱難梭菌Clostridium difficile凍干物安全等級:2模式菌株:no研究、質(zhì)量控制硫乙醇鹽培養(yǎng)基::酪胨15.0g,酵母浸出5.0g,葡萄糖5.0g,硫乙醇鈉0.5g,L-胱氨0.5g,刃天青0.001g,2.5g,pH7.1±0.2。121℃,15min。生長條件:36℃,厭氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Escherichia coli EHEC O157:H7 出血性大腸埃希氏菌 O157:H7Escherichia coli EHEC O157:H7凍干管、試管斜面安全等級:2模式菌株:no研究、質(zhì)量控制營養(yǎng)瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長條件:37℃,好氧生長特性G-桿菌,賴氨脫羧酶、鳥氨脫羧酶均陽性,精氨雙解酶陰性,有動力,IMViC實驗:+、+、-、-,尿素酶、丙氨脫氨酶陰性,不產(chǎn)H2S,不發(fā)酵山梨醇、纖維二糖和側(cè)金盞花醇,MUG陰性,發(fā)酵乳糖、甘露醇。兼性厭氧,適pH7.4~7.6。血清型:O 157 : H 7。存儲條件:4℃,避光冷藏 純度:95%
Haemophilus influenzae 流感嗜血桿菌Haemophilus influenzae分離基物:57歲患者的肺膿瘍凍干安全等級:1模式菌株:no質(zhì)控菌株;藥敏的試驗;呼吸的研究巧克力平板(成品)生長條件:37℃,5%CO2 純度:天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in
Kocuria│rhizophila 嗜根考克氏菌Kocuria│rhizophila凍干物安全等級:1模式菌株:no抗生物質(zhì)殘留檢查。CM0002生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in
Escherichia coli O157:H7 大腸埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7凍干物安全等級:1模式菌株:no研究;。BBL科瑪嘉質(zhì)控菌株。GB4789.28-2013《食品微生物學檢驗 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》中規(guī)定質(zhì)控菌株。營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃,好氧,24h生長特性血清型O157:H7,山梨醇陰性,Vero 細胸素(志賀素)陰性。存儲條件:2-8℃ 純度:AR,98%
Vibrio harveyi 哈維氏弧菌Vibrio harveyi分離基物:哈維氏弧菌菌株BB120凍干安全等級:1模式菌株:no哈維氏弧菌 BB-170Marine Agar 2216 :蛋白棟 5.00 g ,酵母 1.00 g ,F(xiàn)e(III) citra 0.10 g ,NaCl 19.45 g, 無MgCl2 5.90 g ,Na2SO4 3.24 g, CaCl2 1.80 g ,KCl 0.55 g, NaHCO3 0.16 g, KBr 0.08 g ,SrCl2 34.00 mg ,H3BO3 22.00 mg, Na-silica 4.00 mg ,NaF 2.40 mg, (NH4)NO3 1.60 mg ,Na2HPO4 8.00 mg, 蒸餾 1000.00 ml, pH 7.6 ± 0.2生長條件:30℃,好氧 純度:99%
CSF人集落刺激因子ELISA試劑盒實驗原理酚紅煌綠瓊脂豬晶狀體上皮肝竇內(nèi)皮phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗原
水瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)皮培養(yǎng)基肝星形CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(抗原)
半固體營養(yǎng)瓊脂平滑肌培養(yǎng)基腎實質(zhì)phospho-CREB-1 磷化環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(多肽)
RVS肉湯周邊培養(yǎng)基腎系膜ADRA2 peptide 腎上腺素能受體2抗原
MKTTn肉湯基礎(chǔ)腦膜培養(yǎng)基膀胱上皮CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子
M肉湯神經(jīng)前體培養(yǎng)基膀胱平滑肌CT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)
煌綠肉湯增菌液基礎(chǔ)神經(jīng)前體分化培養(yǎng)基腎動脈內(nèi)皮CT-R (Calcitonin receptor) 降鈣素受體(抗原)
Rustigian氏尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)少突膠質(zhì)培養(yǎng)基腎動脈平滑肌Ferritin peptide 鐵蛋白抗原
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。