當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TE2人雌二醇ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | E2人雌二醇ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Estradiol, E2 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63653 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Streptomyces kanamyceticus 卡納霉素鏈霉菌Streptomyces kanamyceticus凍干物安全等級:1Type strain; Produces kanamycin高氏合成一號瓊脂:可溶性淀 20.0 g,KNO3 1.0 g,K2HPO4 0.5 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,NaCl 0.5 g,FeSO4 0.01 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.2-7.4。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Hydrocarboniphaga│daqingensis 大慶食烴菌Hydrocarboniphaga│daqingensis分離基物:凍干物安全等級:1模式菌株:7生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pelagibacrium│halotolerans 耐鹽海桿菌Pelagibacrium│halotolerans分離基物:海凍干物安全等級:1模式菌株:223生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Bacillus atrophaeus 深褐芽孢桿菌Bacillus atrophaeus凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no熱空氣消控制生物學(xué)指標(biāo);產(chǎn)生L-desoxynojirimycin營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:30℃,好氧。存儲條件:2-8℃冷藏 純度:≥98%
Trichophyton mentagrophys 須癬毛癬菌(斜面)Trichophyton mentagrophys斜面安全等級:2模式菌株:no綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧 純度:97%
Lactobacillus│ 乳菌Lactobacillus│凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0002生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98%
Lactobacillus gasseri 格氏乳桿菌Lactobacillus gasseri凍干物安全等級:1模式菌株:no微生態(tài)制劑MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉 8.0g,酵母 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,鈉 5.0 g,檸檬三銨 2.0 g,磷氫二鉀 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,微好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pectobacrium carotovorum 胡蘿卜軟腐病堅固桿菌Pectobacrium carotovorum凍干物安全等級:1模式菌株:no營養(yǎng)肉汁瓊脂 :蛋白胨 10.0 g,牛肉提取物 3.0 g,NaCl 5.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.0生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
E2人雌二醇ELISA試劑盒實驗原理Mast Cell Tryptase 肥大蛋白酶7抗體乙酰半胱氨3-(3,4-二甲氧基苯)Human PGDS (Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit
TPSB2 肥大類胰蛋白酶β2N-乙酰-L-酪氨3-噻吩二Human EP2 (Prostaglandin E Receptor 2 ) ELISA Kit
MC-1R 黑皮質(zhì)素-1受體抗體L-鹽賴氨3-噻吩二Human EP3 (Prostaglandin E Receptor 3) ELISA Kit
MCSF Receptor 巨噬集落激因子受體抗體三磷腺苷二鈉乙酰溴-α-D-葡萄糖甲酯Human PGF (Prostaglandin F) ELISA Kit
phosphoM-CSF Receptor(Tyr546) 磷化巨噬集落激因子受體抗體胞磷膽鈉3-氨基苯頻吶酯Human PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit
phospho CSF1R (Tyr699) 磷化巨噬集落激因子受體抗體苯氨3-氨基苯頻吶酯Human FP (Prostaglandin F Receptor) ELISA Kit
phospho-M-CSF Receptor(Tyr708) 磷化巨噬集落激因子受體抗體L-脯氨3,3'-二羥基二苯二硫Human PTGIS (Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit
phospho-CSF1R (Tyr723) 磷化巨噬集落激因子受體抗體氨3,3'-二羥基二苯二硫Human PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2) ELISA Kit
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