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表皮葡萄球菌(SE)核酸檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-05-10 13:38:28瀏覽次數(shù):144次

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表皮葡萄球菌(SE)核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:表皮葡萄球菌(SE)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10452
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR:
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。
曲霉屬培養(yǎng)基: CM0018產(chǎn)生6'OH-Aspulvinone H,Curvulol提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié)

乳乳球菌霍氏亞種培養(yǎng)基: CM0005模式菌株: no奶提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

結(jié)核分枝桿菌生長條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法

炭疽芽胞桿菌培養(yǎng)基: CM0116研究提供形式: 其他安全等級: 3模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法

ATCC-VR94模式菌株: yes安全等級: 3種屬: 副粘病屬│1型病料提供形式: 凍存管基礎(chǔ)研究培養(yǎng)基: EMEM+2%FBS

青霉屬活性物質(zhì);抗炎模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C

 -631℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 50℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

黃傘培養(yǎng)基: 14模式菌株: no子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 23 定期移植法

 3.099模式菌株: no安全等級: 1種屬: Rhizopus│sp.曲藥提供形式: 凍干物制甜酒;產(chǎn)葡萄糖苷酶培養(yǎng)基: 0014

根瘤菌(羅頓豆)與羅頓豆共生固氮模式菌株: no羅頓豆根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0053生長條件: 28-30℃

ATCC700778=CIP105746=DSM12751=KCTC3838=LM模式菌株模式菌株: yes種屬: Bacillus│horti提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0503生長條件: 30℃

暗球腔菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no水中腐木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法;其他

 -632℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

里亞氏須腹菌培養(yǎng)基: 14模式菌株: no組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-30 定期移植法

黑曲霉培養(yǎng)基: 14模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 26℃ 真空冷凍干燥法

N-基  粘溴  N-Boc-3-乙酯

反環(huán)丙胺鹽鹽  5-溴-2-胺  N-Boc-2-乙酯

2-溴-4-磺酰  3,5-二  鄰

D-葡糖-gamma-內(nèi)酯丙  5-基吲哚  N-甲基鄰

Sebacic acid  癸二  111-20-6

  火棉膠

n-Hendecane  十一烷  1120-21-4

DIPHENYLAMINE-4-SULFONIC ACID BARIUM SALT  二磺鋇  6211-24-1

大鼠異檸檬脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒 ,英文名: ICD ELISA Kit

人抗DNA酶B抗體(ai-DNaseB)ELISA檢測試劑盒Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseBELISAKit 96T/48T

大鼠阿黑皮素原(POMC)免疫試劑盒 Rat Pro-opiomelanocoin,POMC ELISA KIT

CLIAKitfoAb(MouseThyroxineaibody)ELISAKit小鼠甲狀腺素抗體規(guī)格:48T/96T

人體PR-A基因甲基化檢測試劑盒-現(xiàn)貨20次

ELISAKitai-toxIgG人抗弓形體IgG抗體規(guī)格:48T/96T
表皮葡萄球菌(SE)核酸檢測試劑盒小白菊內(nèi)酯20554-84-1英文名:Parthenolide  

英文別名:2,3,6,7,7a,8,10a,10b-Octahydro-1a,5-dimethyl-8-methyleneoxireno(9,10)cyclodeca(1,2-b)furan-9(1aH)-one;Parthenolide;4Xi-germacra-1(10),11(13)-dien-12-oic acid, 4,5-epoxy-6.alpha.-hydroxy-, gamma-lactone;Oxireno(9,10)cyclodeca(1,2-B)furan-9(1ah)-one, 2,3,6,7,7A,8,10A,10B-octahydro-1A,5-dimethyl-8-methylene-;Parthenlide  

登錄號:20554-84-1

分子式:C15H20O3

分子量:248.32

分子結(jié)構(gòu):

外觀:棕黃色粉末

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來源:木蘭科觀光木屬植物宿軸木蘭(Tsoongiodendronodorum Chun)

溶解性:溶于、、DMSO等有機(jī)溶劑,不溶于水。

熔點(diǎn):115 °C

藥理藥效:主要用于治療皮膚感染、風(fēng)濕病和偏頭疼,并能使腫瘤細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞周期阻滯,抑制腫瘤細(xì)胞增殖。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
PCR的反應(yīng)條件:
因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小,設(shè)定25~30個(gè)循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴(kuò)增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時(shí),每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時(shí), 時(shí)間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時(shí)會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時(shí),容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時(shí)間太短時(shí),會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時(shí)間太長時(shí),會出現(xiàn)Smear。

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