當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TTSH人促甲狀腺素ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | TSH人促甲狀腺素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Thyroid Stimulating Hormone, TSH Elisa Kit |
貨號 | FS-H63651 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Acidithiobacillus ferrooxidans 氧化亞鐵硫桿狀菌(不提供)Acidithiobacillus ferrooxidans分離基物:性的瀝青樣的煤炭礦流出物凍干物安全等級:1模式菌株:DSM 882 LEPTOSPIRILLUM (HH) MEDIUM:溶液A: (NH4)2SO4 132.0 mg MgCl2·6 H2O 53.0 mg KH2PO4 27.0 mg CaCl2·2 H2O 147.01 mg 蒸餾 950.0 ml 用10N H2SO4 調(diào)節(jié)pH 至 1.8。 溶液B: FeSO4 · 7 H2O 20.0 g H2SO4 0.25 N 50.0 ml pH 1.2 微量元素溶液: MnCl2 · 2 H2O 62.0 mg ZnCl2 68.0 mg CoCl2· 6 H2O 64.0 mg H3BO3 31.0 mg Na2MoO4 10.0 mg CuCl2· 2 H2O 67.0 mg 蒸餾 1.0 L 用10N H2SO4調(diào)節(jié) pH 至1.8 上述溶液分別在121℃,滅菌 15 min。臨用前將A液和B液混合并加入1ml 微量元素溶液。調(diào)節(jié)pH 至1.8。生長條件:25℃,好氧生長特性革蘭氏陰性、自養(yǎng)、氧化鐵或硫存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Prevola inrmedia 中間普氏菌Prevola inrmedia分離基物:膿胸安全等級:1模式菌株:noTSA+5%脫纖維羊血:胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g,大豆蛋白胨(大豆木瓜蛋白酶消化物) 5.0g, 5.0g,瓊脂 15.0g,pH7.3±0.2。121℃,15min。滅菌后無菌條件添加5%脫纖維羊血。生長條件:37℃,嚴(yán)格厭氧。 純度:97%
Bacillus quilensis 特基拉芽孢桿菌Bacillus quilensis分離基物:印染廢;采集地│第二印染廠凍干物安全等級:1模式菌株:noLB培養(yǎng)基:酵母提取物5.0g,蛋白胨10.0g,NaCl 10.0g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH 7.0。生長條件:30℃,好氧生長特性革蘭氏陽性、嚴(yán)格好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97%
Bifidobacrium pseudocanulatum 假鏈雙歧桿菌Bifidobacrium pseudocanulatum分離基物:feces of infant凍干物安全等級:1模式菌株:改良MRS培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:+0.5%L-半胱氨(MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉 8.0g,酵母 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,鈉 5.0 g,檸檬三銨 2.0 g,磷氫二鉀 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。)生長條件:37℃,厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97%
Proiniphilum│acetatigenes 產(chǎn)嗜蛋白質(zhì)菌Proiniphilum│acetatigenes分離基物:顆粒污泥凍干物安全等級:1模式菌株:942生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Gardnerella│vaginalis 加德納菌Gardnerella│vaginalis凍干物安全等級:2865生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99%
Ganoderma sinense 中華靈芝 (紫芝)(斜面)Ganoderma sinense分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no靈芝多糖綜合PDA瓊脂:馬鈴薯提取液1.0L ,葡萄糖20.0g ,KH2PO4 3.0g ,MgSO4·7H2O 1.5g ,維生素B1微量,瓊脂15.0g ,pH 6.0生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Nocardia asroides 星狀諾卡氏菌Nocardia asroides凍干物安全等級:1模式菌株:葡萄糖、天門冬素瓊脂培養(yǎng)基:葡萄糖 10.0 g,天門冬素 0.5 g,K2HPO4 0.5 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.2-7.4。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
TSH人促甲狀腺素ELISA試劑盒實驗原理Maspin 抑癌基因抗體核糖核酶A溴硫磷 Human GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit
MASP 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨肽酶1抗體人胰島素雙(三苯基膦)化銨Human GCK (Glucokinase) ELISA Kit
MASP2 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨肽酶2抗體胸腺肽α1雙(三苯基膦)化銨Human GKRP (Glucokinase Regulatory Protein) ELISA Kit
Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體人生長激素釋放抑制因子3,5-二苯磺酰Human GOD (Glucose Oxidase) ELISA Kit
MBP 髓鞘性蛋白抗體甲酰化人生長激素3,5-二苯磺酰Human GLUT1 (Glucose Transporter 1) ELISA Kit
CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65 巨病PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體腺苷鈷胺2--4-苯胺Human GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit
HCMV 人巨病前列地爾2--4-苯胺Human GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit
HCMV UL23 人巨病UL23抗體尿苷1--2-(氧基)苯Human GLUT4 (Glucose Transporter 4) ELISA Kit
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