當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T膠原酶I撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
膠原酶I撫生ELISA試劑盒 | Collagenase I | FS-P65405 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
白介素-17抗體產(chǎn)品別名: 2-氟-4-三氟甲芐野馬追內(nèi)酯A(標準品)
白介素-18/干擾素γ誘導因子抗體產(chǎn)品別名: 4-氟-3-三氟甲氧苯酚野馬追內(nèi)酯B(標準品)
白介素1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體產(chǎn)品別名: 乙紫野馬追內(nèi)酯K
白介素1β/IL-1β抗體產(chǎn)品別名: 2--6-氟-3-甲野牡丹(標準品)
白介素2抗體(大、小鼠)產(chǎn)品別名: 4--2,6-二氟苯甲野木瓜(標準品)
白介素-2單克隆抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-4--6-氟苯酚野漆樹苷(標準品)
白介素-23抗體產(chǎn)品別名: 2--6-氟-3-甲氧苯甲葉黃素; 二羥-d-胡蘿卜素(標準品)
白介素4抗體產(chǎn)品別名: 3,5-二氟-4-甲氧葉(標準品)
白介素6產(chǎn)品別名: 11-溴十一葉下珠(標準品)
白介素6抗體產(chǎn)品別名: 2,7-二溴-9,9-二甲芴夜香牛(標準品)
白介素6抗體產(chǎn)品別名: 3-芐溴一點紅(標準品)
抑制素A/Inhibin α抗體產(chǎn)品別名: (S)-(+)-1-氨-2-一葉秋堿 ,一葉萩堿(標準品)
雞傳染性喉氣管炎病糖蛋白E抗體產(chǎn)品別名: 2,6-二氟-3-甲氧芐一枝黃花(標準品)
小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體產(chǎn)品別名: 1,1,1-三(4-羥苯)乙烷伊貝母(新疆貝母)(標準品)
白介素-7受體a抗體產(chǎn)品別名: 4-乙氧-3-氟苯乙酰丁香酚
膠原酶I撫生ELISA試劑盒Human MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit瓦克青霉拉丁屬名: Penicillium waksmanii
Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human ENDOD1 (Endonuclease domain-containing 1 protein) ELISA KIT巴斯德畢赤酵母拉丁屬名: Pichia pastoris
Human DSTYK (Dual serine/threonine and tyrosine protein kinase) ELISA KIT蔗糖小迫氏菌拉丁屬名: Kosakonia sacchari
Human DUPD1 (Dual specificity phosphatase DUPD1) ELISA KIT球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human DOHH (Deoxyhypusine hydroxylase) ELISA KIT球毛殼菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human ENAM (Enamelin) ELISA KIT鹿皮色曲霉拉丁屬名: Aspergillus cervinus
Human DISP2 (Protein dispatched homolog 2) ELISA KIT根瘤菌用途: 與蒙古巖黃芪共生固氮
Human DNASE1L2 (Deoxyribonuclease-1-like 2) ELISA KIT灰酒紅鏈霉菌用途: 分類 研究
Human DIRC1 (Disrupted in renal carcinoma protein 1) ELISA KIT桃色枝頂孢拉丁屬名: Acremonium persicinum
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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