僅供科研實驗，不做其他用途！

商品介紹：

HPLC注意事項：

1.流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細的膜過濾)。

2.流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。

3.不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進液。

4.使用緩沖溶液時，做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20ml以上。

5.長時間不用儀器，應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機相(如甲醇等)，因為純水易長霉。

6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

7.C18柱不能進蛋白樣品，血樣、生物樣品。

8.堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗，清洗方法；①以異丙醇作溶劑沖洗：②放在異丙醇中間用超聲波清洗；

9.氣泡會致使壓力不穩(wěn)，重現(xiàn)性差，所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。

10.如果進液管內(nèi)不進液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清。

11.要注意柱子的PH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。

12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。

注意事項：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用.

β萘酚(β-Nph) Human LRCH2 ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。微泡菌屬

凝聚(CLU)Human LRDD ELISA Kit英文名稱: Lactobacillus farraginis 金雀兒根瘤蒼白桿菌

二磷腺(ADP)Human LRMP ELISA Kit青枯假單胞菌(不提供）

5羥基乙(5-HIAA)Human LRP2BP ELISA Kit用途: 害蟲生物防治串珠鐮孢（斜面）

12羥二十烷四烯(12-HETE)Human LRPPRC ELISA Kit英文名稱: Kodamaea kakaduensis卷枝毛霉（斜面）

羥脯(Hyp)Human LRPAP1 ELISA Kit英文名稱: Saccharomyces  cerevisiae婁地青霉（不提供）

一氧化氮(NO)Human LRRC1 ELISA Kit英文名稱: Aspergillus niger云芝（斜面）

維生C(VC)Human LPHN3 ELISA Kit英文名稱: Salinibacterium  amurskyense成團腸桿菌

維生B6(VB6)Human LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA KitChitinophagarupis

可溶性P選擇(sP-selectin)Human LPP ELISA KitDeinococcusaquatilis

基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)Human LPIN2 ELISA Kit英文名稱: Paenibacillus graminisChitinophagapinensis

維生D(VD)Human LPPR2 ELISA Kit英文名稱: Trametes ochracea紫桿菌

維生K1(VK1)Human LPXN ELISA KitSphingomonasaerophila

維生B12(VB12)Human LRAT ELISA Kit英文名稱: Pythium myriotylumMethylobacteriumvariabile

維生D3(VD3)Human LPIN2 ELISA Kit規(guī)格: 1mg/ml×5mlSphingomonasabaci

維生D2(VD2)Human LRCH1 ELISA Kit用途: 食用Rhodococcusfascians

前纖維蛋白1抗體免疫試劑盒10號染色體開放閱讀框81抗體Na+/H+交換體3(NHE3)苦木西 S

前纖維蛋白1免疫試劑盒19號染色體開放閱讀框47抗體Na+/H+交換體3(NHE3)苦杏 A

前鐵調(diào)(Pro-Hepc)免疫試劑盒19號染色體開放閱讀框54抗體孤腓肽(OFQ/N)苦杏 B

前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體孤腓肽(OFQ/N)闊葉
雞屎藤苷酸標(biāo)準(zhǔn)品adenovirus expressing mCherry-GFP-LC3B fusion protein

產(chǎn)品規(guī)格：1ml|10×1ml

發(fā)貨周期：1～3天

本品是一種可以表達mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒，可以用于感染細胞或組織后進行細胞自噬的檢測。

LC3是酵母自噬關(guān)鍵蛋白ATG8在哺乳動物中的同源蛋白。LC3初被分析鑒定為microtubule-associated protein 1 light chain 3。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亞家族，其中對于LC3B的研究為廣泛。到目前為止，LC3B被認為是細胞自噬信號通路為關(guān)鍵的標(biāo)志性蛋白。LC3B是一個具有125個氨基殘基的蛋白，在蛋白合成后，被Atg4所切而失去了C端的22個氨基蛋白，從而暴露出C端的甘氨，人們把它命名為胞質(zhì)形式的LC3B I。在細胞自噬的過程中，其C端暴露的甘氨經(jīng)過一個類似泛化的過程，以ATG7為E1樣激活， 以ATG3為E2樣連接，以Atg12-Atg5-Atg16復(fù)合物為E3樣連接，在C端甘氨上共價連接上磷脂酰(phosphatidylethanolamine,PE)而成為LC3B-PE即LC3B II。與胞質(zhì)定位的LC3B I不同，LC3B II定位于自噬體的內(nèi)膜和外膜上。在自噬體與溶體融合后，自噬體外膜上的LC3B II被Atg4所切，而自噬體內(nèi)膜上的LC3B II則被溶體內(nèi)的蛋白所降解。盡管LC3B II比LC3B I的分子量要大，但由于其的疏水性，在SDS-PAGE電泳時，LC3B II比LC3B I遷移得更快，其表觀分子量分別為14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染細胞后，在非自噬的情況下，熒光顯微鏡下GFP-LC3B以彌散的形式存在于細胞質(zhì)中；而在自噬的情況下，熒光顯微鏡下GFP-LC3B則聚集在自噬體膜上，以斑點的形式表現(xiàn)出來。

自噬是一種在進化上高度保守的通過溶體吞噬并降解部分自身組分的細胞內(nèi)分解代謝途徑。自噬與多種生理功能有關(guān)，在饑餓等不利的環(huán)境條件下， 細胞通過自噬降解多余或異常的細胞內(nèi)組分，為細胞的生存提供能量及原材料，促進生物體的生長發(fā)育、細胞分化及對環(huán)境變化產(chǎn)生應(yīng)答。自噬異常與多種病理過程如腫瘤、神經(jīng)退行性疾病、代謝疾病、病原體感染等都有密切關(guān)系。由于細胞自噬在生理和病理過程中都有重要作用，自噬已經(jīng)成為細胞生物學(xué)領(lǐng)域的一個新的研究熱點。

Ad-mCherry-GFP-LC3B是的重組腺病毒，感染后能夠在靶細胞中有效表達紅色熒光蛋白mCherry、綠色熒光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白，呈現(xiàn)明亮的紅色和綠色熒光，可以用于細胞自噬的檢測。

自噬小體在與溶體融合過程中，溶體內(nèi)的性環(huán)境會導(dǎo)致GFP熒光淬滅，這為追蹤GFP-LC3B的細胞定位增加了難度。mCherry是一種來自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的單體紅色熒光蛋白，當(dāng)其與GFP進行LC3B的共同標(biāo)記時，在GFP被溶體性環(huán)境所淬滅的情況下，可以發(fā)出紅色熒光的mCherry因為其的穩(wěn)定性而被保留。因此，通過融合表達mCherry-GFP-LC3B蛋白，可以非常有效地追蹤自噬過程。在用Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒感染細胞后，在非自噬的情況下，熒光顯微鏡下mCherry-GFP-LC3B以彌散的黃色熒光(mCherry和GFP的綜合效果)形式存在于細胞質(zhì)中；而在自噬的情況下，熒光顯微鏡下mCherry-GFP-LC3B則聚集在自噬體膜上，以黃色斑點的形式表現(xiàn)出來(LC3B dot or punctae)；當(dāng)自噬體與溶體融合后，因GFP熒光的部分淬滅而以紅色斑點的形式表現(xiàn)出來。

腺病毒感染細胞后為瞬時表達，通常不會與基因組DNA重組，不能用于篩選穩(wěn)定細胞株。本產(chǎn)品感染體內(nèi)外細胞后，有效表達時間通常不少于7天，不同細胞和組織的有效表達時間有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表達很可能會大大減弱。

本產(chǎn)品可以在表達E1的HEK293A、HEK293等適當(dāng)細胞中擴增。

本產(chǎn)品的滴度≥1×108 pfu/ml，使用時可以按照108pfu/ml進行計算。如果按照20 MOI感染6孔板的細胞，每孔50萬細胞計算，共可以感染10個孔；如果按照20 MOI感染24孔板的細胞，每孔10萬細胞計算，共可以感染50個孔。如果MOI值提高，則相應(yīng)可以感染的孔數(shù)會減少；如果MOI值降低，則相應(yīng)可以感染的孔數(shù)會增加。

儲存條件：-20℃，有效期1～2個月。