當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TUb人泛素蛋白ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | Ub人泛素蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Ubiquitin, Ub Elisa Kit |
貨號 | FS-H64377 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體英文全稱Poliovirus IgA antiobody英文簡稱PV-IgA 檢測范圍:1556nmol/L-
軟骨蛋白聚糖抗體英文全稱14-3-3 protein family英文簡稱1433PF 檢測范圍:727nmol/L-1200pg/mL
軟骨蛋白1抗體英文全稱Human leucocyte antigen-Dr15英文簡稱HLA-Dr15 檢測范圍:1315nmol/L-1200pg/ml
珠蛋白2抗體英文全稱Shock Proteins 70英文簡稱SPs70 檢測范圍:6276nmol/L-200ng/ml
珠蛋白1抗體英文全稱juvenile hormone-II英文簡稱JH-II 檢測范圍:6273nmol/L-160pg/ml
腫瘤自身抗原LMO4抗體英文全稱4-Hydroxynonenal英文簡稱HNE 檢測范圍:6211nmol/L-1000pg/mL
腫瘤新因子1抗體英文全稱respiratory syncytial virus IgM英文簡稱RSV-IgM 檢測范圍:1567nmol/L-
腫瘤病受體同源蛋白抗體英文全稱13-LOX英文簡稱13-LOX 檢測范圍:3871nmol/L-160U/L
L-Prolinamide 規(guī)格:0.98 牛纖維蛋白原抗體
N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine 規(guī)格:>98%,BR 纖維母生長因子受體底物3抗體
O-Benzyl-L-serine 規(guī)格:>98%,BR 纖維連接蛋白抗體
O-tert-Butyl-L-serine 規(guī)格:純度98%,BR 凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體
CAL-101(GS-1101) 規(guī)格:>99%,選擇性p110δ抑制劑 凝血因子11重鏈抗體
O-tert-Butyl-L-threonine 規(guī)格:98%,BR 凝血因子12輕鏈抗體
L-dopa,Levodopa 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 叉頭蛋白D1抗體
L-dopa 規(guī)格:HPLC>97%,BR 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶11抗體
L-a-Aminoadipicacid 規(guī)格:>98%,BR 干擾素誘導(dǎo)蛋白15抗體
枸橘甙 Poncirin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
山柰酚-3-O-蕓香糖苷(*苷) Kaempferol rutinoside (fireworks glycoside) -3-O- 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
非洲防己,咖倫明, 非洲防己胺 Palmatine, columbamine Ka Lun Ming, 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
芍藥內(nèi)酯苷 Albiflorin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
環(huán)氧澤瀉烯 Epoxy Alisma ene 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
利卡靈-B;利卡靈B Licka Ling Ling B -B; pepole 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
芥子硫氰鹽 Sinapine thiocyanate 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
甜橙黃 The orange flavone 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
5去甲川陳皮素 5 go armour nobiletin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
川陳皮素;川皮亭;蜜橘黃素 Nobiletin; Sichuan leather Pavilion; nobiletin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
去氫駱駝蓬 Harmine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
鹽去氫駱駝蓬 Harmine hydrochloride 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
Ub人泛素蛋白ELISA試劑盒實驗原理性發(fā)育轉(zhuǎn)錄因子蛋白DMO抗體Porcine TFR2 (Transferrin Receptor 2) ELISA Kit
無胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征)Porcine SELL (L-Selectin) ELISA Kit
軸絲動力蛋白10抗體Porcine CTXI (Cross Linked C-opeptide of Type I Collagen) ELISA Kit
D型天冬氨抗體Porcine τPK1 (Tau-Protein Kinase) ELISA Kit
DYDC1蛋白抗體Porcine PL (Pancreatic Lipase) ELISA Kit
二氫嘧抗體Porcine GMCSF/CSF2(Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor 2) ELISA Kit
脫磷輔酶A結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Porcine VS (Versican/PG-M) ELISA Kit
DCST1蛋白抗體Porcine GAL2 (Galectin 2 ) ELISA Kit
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