產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：膀胱平滑肌細(xì)胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9822

產(chǎn)品類型：原代細(xì)胞

單位：T25/瓶

提供細(xì)胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse GATA binding protein 4,GATA4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠神經(jīng)Y(NP-Y)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse neuropeptide Y,NP-Y ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠生長釋放多(GHRP)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Gelsolin ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠促性腺釋放(GnRH)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠抑制B(INH-B)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse inhibin B,INH-B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠促甲狀腺釋放(TRH)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠促腎上皮質(zhì)釋放(CRH)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠胰島受體β(ISR-β)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Insulin Receptor β,ISR-β ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
膀胱平滑肌細(xì)胞ALR  肝再生增強因子抗體規(guī)格: 0.1ml

Insulin Receptor R  胰島受體相關(guān)受體抗體規(guī)格: 0.2ml

Islet 1  胰島基因增強結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

Lipin 1  磷脂磷酯LPIN1抗體規(guī)格: 0.2ml

AP-TNAP/ALPL  堿性磷抗體規(guī)格: 0.1ml

PGC1 beta  過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體規(guī)格: 0.2ml

PGC1 alpha + beta  過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體規(guī)格: 0.2ml

SERPINA12/Vaspin  內(nèi)臟脂肪組織源性蛋白抑制蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml