ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Ralstonia│mannitolily 解甘露醇羅爾斯通氏菌Ralstonia│mannitolily分離基物:土壤凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no820生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：97%

Magnetotactic│bacrium 趨磁細(xì)菌Magnetotactic│bacrium分離基物:泥樣凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no781生長條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：97%

諾拉彈狀病屬│ 傳染性造血器官壞死病諾拉彈狀病屬│分離基物:病料凍存管安全等級(jí):3基礎(chǔ)研究MEM+5%FBS生長條件:15℃存儲(chǔ)條件:-70 純度：98%

肺病屬│A型 人呼吸道合胞病肺病屬│A型分離基物:病科凍存管安全等級(jí):3基礎(chǔ)研究EMEM+2%FBS生長條件:37oC存儲(chǔ)條件:-70 純度：98%

Clostridium│botulinum A型肉梭菌Clostridium│botulinum其他安全等級(jí):3模式菌株:noCM0121生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Lactobacillus│crispatus 卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus分離基物:健康孕婦分泌物凍干物安全等級(jí):1模式菌株:noCM0006生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度：98%

Halobacrium│salinarum 鹽沼鹽桿菌Halobacrium│salinarum分離基物:sald fish凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no212生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：97%

Exiguobacrium acetylicum 乙酰微桿菌Exiguobacrium acetylicum分離基物:Creamy was凍干物安全等級(jí):1模式菌株:營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:30℃，好氧存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度：1mol/L THF溶液
17-OHP人17羥孕酮ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Microsporidia protien  蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體尤瑞克林2-乙?；?6-甲氧基吡Human Ep-CAM/CD326 (Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit

Midnolin isoform Protein 1  中腦核仁蛋白1抗體門冬酰胺酶（大腸桿菌）2-乙?；?6-甲氧基吡Human BGN (Biglycan) ELISA Kit

MIDN  中腦核仁蛋白抗體門冬酰胺酶（歐文菌）D-半乳糖烯Human NRG-1 (Neuregulin 1) ELISA Kit

Midkine  中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體鮭降鈣素D-半乳糖烯Human NKA (Neurokinin A) ELISA Kit

MLCK  肌球蛋白輕鏈激酶抗體5’-胞苷(S)-(+)-扁桃甲酯Human NKB (Neurokinin B) ELISA Kit

MLK3  絲氨/蘇氨蛋白激酶MLK3抗體4'羥基(S)-(+)-扁桃甲酯Human NT (Neurotensin) ELISA Kit

Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)  磷化絲氨/蘇氨蛋白激酶MLK3抗體5'-羥基吲哚乙3-苯并[b]噻吩-2-甲Human GMFB (Glia Maturation Factor, Beta) ELISA Kit

MYL1/MYL2  肌球蛋白輕鏈1/2抗體馬尿3-苯并[b]噻吩-2-甲Human GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)