當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TPS人磷脂酰絲氨酸ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | PS人磷脂酰絲氨酸ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human phosphatidylserine, PS Elisa Kit |
貨號 | FS-H63685 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Shewanella│oneidensis 奧奈達(dá)湖希瓦氏菌Shewanella│oneidensis分離基物:沉積物凍干物模式菌株:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Bacillus│niabensis 農(nóng)研所芽孢桿菌Bacillus│niabensis分離基物:樣/表層海斜面培養(yǎng)物模式菌株:no近海細(xì)菌471生長條件:20-25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Enrobacr│ludwigii 路氏腸桿菌Enrobacr│ludwigii分離基物:沉積物/電視抓斗的乳黃色鈣質(zhì)軟泥凍干物模式菌株:no端微生物/耐壓菌;產(chǎn)酶微生物/淀酶1001生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Aspergillus│penicillioides 帚狀曲霉Aspergillus│penicillioides分離基物:沉積物/TVG沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株:no大洋絲狀真菌14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Penicillium│stoloniferum 匐枝青霉Penicillium│stoloniferum分離基物:生物樣/海鞘斜面培養(yǎng)物模式菌株:no可做抑真菌、抑腫瘤研究。475生長條件:18-20℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97%
Sarocladium│kiliense 帚枝菌Sarocladium│kiliense分離基物:沉積物/上覆斜面培養(yǎng)物模式菌株:no大洋絲狀真菌475生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Acidithiobacillus│sp. 嗜硫桿菌Acidithiobacillus│sp.分離基物:其他/礦渣斜面培養(yǎng)物模式菌株:no亞鐵氧化途徑研究、硫氧化途徑研究、生物浸礦826生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pannonibacr│phragmitus 棲植物潘隆尼亞湖桿菌Pannonibacr│phragmitus分離基物:生物樣/腐爛的蘆葦莖斜面培養(yǎng)物模式菌株:,用于分類學(xué)研究。471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
PS人磷脂酰絲氨酸ELISA試劑盒實驗原理NMP22 核基質(zhì)蛋白22抗體去甲氧基姜黃素1,2-二代苯-d4Human SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit
Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗體雙去氧基姜黃素甲磺伊馬替尼Human CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit
Nociceptin receptor 孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體莪術(shù)甲磺伊馬替尼Human CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA Kit
Nogo R 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體金絲桃苷甲磺伊馬替尼Human CCND1 (Cyclin-D1) ELISA Kit
Nogo-A 軸索過度生長抑制因子-A抗體金絲桃素2,4,5-三苯乙Human CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit
Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/A抗體絞股藍(lán)皂苷2,4,5-三苯乙Human CCND3 (Cyclin-D3) ELISA Kit
NOS-1 一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)苦杏仁苷4--2-基芐Human FLNα (Filamin A, Alpha) ELISA Kit
NOS-2/iNOS 一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)苦參4--2-基芐Human FLNβ (Filamin B, Beta) ELISA Kit
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