當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T載脂蛋白C1撫生ELISA試劑盒
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
載脂蛋白C1撫生ELISA試劑盒 | apoprotein C1 | FS-P66116 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
粘蛋白15抗體MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原辣椒堿,辣椒素(天然提取)
質(zhì)金屬蛋白酶22抗體MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原辣椒堿,辣椒素(合成)
肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白抗體MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原萊苞迪甙C(標(biāo)準(zhǔn)品)
候選腫瘤抑制因MARVELD1抗體MMP-10(matrix metalloproteinase 10) 質(zhì)金屬蛋白酶-10抗原萊苞迪甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)
成熟T淋巴增殖蛋白1抗體MPO peptide 髓過氧化物酶抗原老鸛草素(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲裂原活化蛋白激酶8相互作用蛋白1抗體MRP2 (multidrug resistance-associated protein2) 多藥耐藥相關(guān)蛋白2酪(標(biāo)準(zhǔn)品)
肌球蛋白輕鏈6抗體MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原雷酚內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28) 線粒體核糖體蛋白L28(抗原)雷公藤紅素(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化黑色素瘤粘附分子CD146抗體MLH1(Mutl homolog l gene) 錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原雷公藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)
肌增強(qiáng)因子2C抗體MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原雷公藤內(nèi)酯酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
促黑激素γ1抗體MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原類葉升麻苷,毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
小鼠抗酮激酶-M2抗體MLN(Motilin)peptide 胃動(dòng)素多肽利卡靈-B(標(biāo)準(zhǔn)品)
化多聚腺苷結(jié)合蛋白抗體mTOR(Mammalian target of rapamycin) 雷帕霉素靶蛋白利血平(標(biāo)準(zhǔn)品)
有絲分裂原誘導(dǎo)因6抗體Muc-1/CD227 Anti-gen (mucin-1) 粘蛋白-1/上皮膜抗原櫟櫻(標(biāo)準(zhǔn)品)
線粒體融合蛋白Mfn2抗體MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓樣分化蛋白抗原連翹苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
載脂蛋白C1撫生ELISA試劑盒Anti-PDPN Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Anti-PDX1 Antibody類食品乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus paralimentarius
Anti-PEBP1 Antibody蕈狀芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Anti-PEBP1 Antibody蘇云金芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PECAM1 Antibody圓弧青霉拉丁屬名: Penicillium aurantiogriseum
Anti-PECAM1 Antibody磺菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PECAM1 Antibody廈門海源桿菌拉丁屬名: Idiomarina xiamenensis
Anti-PECAM1 Antibody維多利亞維希尼克氏酵母拉丁屬名: Vishniacozyma victoriae
Anti-PECAM1 Antibody膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-PECAM1 AntibodyEnsifer adhaerens注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
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