產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：腎小球內皮細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9817

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠抗復合物(TAT)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠抗受體(ATR)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠受體(TR)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse thrombin receptor,TR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠磷肌3激(PI3K)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠β內啡(β-EP)ELISA試劑盒英文名稱：mouse Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠蛋白激B(PKB)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse protein kinase B,PKB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠血紅氧合2(HO-2)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Crosslaps,Cr ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠促卵泡(FSH)ELISA試劑盒英文名稱：mouse follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠Ⅰ型前膠原C末端(CⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨橋(OPN)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Osteopontin,OPN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠促腎上腺皮質(ACTH)ELISA試劑盒英文名稱：mouse adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

小鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
腎小球內皮細胞Aldolase A  醛縮A抗體規(guī)格: 0.1ml

Aldolase C  醛縮C抗體規(guī)格: 0.2ml

ALF/GTF2A1LF  通用轉錄因子IIA樣因子抗體規(guī)格: 0.1ml

ALK/CD246  間變型淋巴瘤激抗體規(guī)格: 0.2ml

CDC27/ANAPC3  后期促進復合蛋白3抗體規(guī)格: 0.1ml

CO4A2  膠原蛋白4a2亞基抗體規(guī)格: 0.2ml

REM/GTP binding protein REM1  GTP結合蛋白REM1抗體規(guī)格: 0.2ml

Laminin 1+2  層粘連蛋白1+2抗體規(guī)格: 0.1ml