當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化磷酸化系列>> Ca++Mg++ ——ATP酶可見分光光度法
貨號 | FS-01S63442 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
50管/24樣 | 可見分光光度法 | FS-01S63442 |
商品介紹:
測定意義 Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。 測定原理: 根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
樣本前處理步驟:
樣本處理前須知
處理任何樣本時,都必須注意:
(1) 實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭(2)實驗前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時對實驗器具進 行清潔,避免污染干擾實驗結果。
(a)組織樣品處理方法: 1、 稱取5±0.05g組織樣品于50ml離心管中,先加入3ml已稀釋好的樣品提取液震蕩2min;再加入10ml乙腈,充分震蕩5min, 2、 加入2g中性氧化鋁;震蕩2min ,室溫4000r/min以上,離心10min;; 3、 取6ml上清液于干凈離心管中,加入5ml二氯甲烷震蕩3min ,室溫4000r/min以上,離心10min;; 4、 取下層清澈液體于玻璃管中,加入20ul氧化劑混勻,在56℃條件下氮氣或空氣流吹至*干燥; 5、 加入1ml復溶液,充分溶解干燥殘留物。 6、 取100ul 上清液與100ul 已稀釋好的復溶液充分混合30s, 7、 取50ul進行分析。 樣本稀釋倍數(shù): 1倍 | (b)水樣品處理方法: 1、取50ul 上清液與450ul 已稀釋好的復溶液充分混合30s, 2、取50ul進行分析。 樣本稀釋倍數(shù):10倍
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實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
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