當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T弓形蟲IgM抗體撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
弓形蟲IgM抗體撫生ELISA試劑盒 | Tox IgM antibody | FS-P65262 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
FMS樣酪氨激酶3配體抗體產(chǎn)品別名: 5''-溴-3,3''-二辛-[2,2':5',2''-三噻吩]-5-甲鹽環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
堿性成纖維生長因子9抗體產(chǎn)品別名: 羥鈷鹽環(huán)侖特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)
原癌因酪氨蛋白激酶FES抗體產(chǎn)品別名: 3-氟-5-溴苯鹽黃酮哌酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
成纖維生長因子16抗體產(chǎn)品別名: 棕櫚異辛酯鹽甲苯噻/泊酚雜質(zhì)J(標(biāo)準(zhǔn)品)
成纖維激活蛋白α抗體產(chǎn)品別名: 2,4-二煙鹽甲芬酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
Fas相關(guān)磷酶1抗體產(chǎn)品別名: 2-乙黃原異丁鹽甲氧那明(標(biāo)準(zhǔn)品)
葉受體4抗體產(chǎn)品別名: (1R,2R)-2-氨環(huán)己鹽鹽鹽金剛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)
Wnt信號受體蛋白抗體產(chǎn)品別名: (1S,2S)-2-氨環(huán)己鹽鹽鹽金剛乙(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化載脂蛋白A1抗體產(chǎn)品別名: 肉桂肟, mixed isomers鹽金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化載脂蛋白A1抗體產(chǎn)品別名: 2-氨-5-溴-4-甲噻唑鹽鹽鹽肼屈(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體產(chǎn)品別名: 1,13-十三烷二鹽卡替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)
脂肪酰水解酶1抗體產(chǎn)品別名: 乙烯酯鹽克林霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)
外質(zhì)蛋白FRAS1抗體產(chǎn)品別名: 2-乙-(5或6)-甲吡鹽喹那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)
富馬水合酶抗體產(chǎn)品別名: N-乙正丁鹽拉貝洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)
成纖維生長因子21抗體產(chǎn)品別名: 4-溴-2,5-二氟苯鹽雷莫司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)
弓形蟲IgM抗體撫生ELISA試劑盒Human OPLAH(5-oxoprolinase) ELISA Kit卡坦正青霉拉丁屬名: Penicillium katangense
Human OPLAH(5-oxoprolinase) ELISA Kit摩洛哥芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human SAAL1(Protein SAAL1) ELISA Kit熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida tropicalis
Human APMAP(Adipocyte plasma membrane-associated protein) ELISA Kit發(fā)狀孢囊游動放線菌拉丁屬名: Actinoplanes capillaceus
Human SRF(Serum response factor) ELISA Kit秦氏蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human MTHFR(Methylenetetrahydrofolate reductase) ELISA Kit灰耳擔(dān)布勒酵母拉丁屬名: Auriculibuller fuscus
Human LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit巴氏醋桿菌羅旺亞種拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus subsp. lovaniensis
Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit傘枝犁頭霉拉丁屬名: Absidia corymbifera
Human KJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit沙漠畢赤酵母拉丁屬名: Pichia deserticola
Human HSD17B10(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase type-2) ELISA Kit黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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