產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：IMCD3

貨號(hào)：FS-01X9640

細(xì)胞培養(yǎng)條件：DMEM/F12+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒Human hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α ELISA Kit

人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒Human transferrin receptor，TFR ELISA Kit

人P53(P53)ELISA試劑盒Human p53/tumor protein， p53/TP53 ELISA Kit

人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒Human Endostatin，ES ELISA Kit

人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒Human ferritin，F(xiàn)E ELISA Kit

人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒Human tissue inhibitor of metal protease 1，TIMP-1 ELISA Kit

人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒Human myelin basic protein autoantibody，MBP ELISA Kit

人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit

人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒human lung cancer Marker ELISA Kit

人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒human gastric carcinoma Marker ELISA Kit

人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit

人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit

人乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒Human mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA Kit

人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit

人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒Human Alpha-fetoprotein，AFP ELISA Kit

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2，TIMP-2 ELISA Kit

人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒Human Oncostatin-M，OSM ELISA Kit
小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞5-HTR3  5-羥色胺受體3抗體 0.1ml

5-HTR4  5-羥色胺受體4抗體 0.1ml

5 lipoxygenase/ALOX5  5-脂氧合酶抗體 0.1ml

Phospho-5-Lipoxygenase(Ser271)  磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.1ml

Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)  磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.1ml

ALOX12/12 Lipoxygenase  12脂氧合酶抗體 0.1ml

Penicillin G  素G抗體 0.1ml

8-OHdG  8-羥基脫氧鳥苷抗體 0.1ml