ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
半胱胺酸蛋白酶-2抗體英文全稱RASAL1英文簡(jiǎn)稱RASAL1檢測(cè)范圍1812nmol/L-10ng/mL

心臟鈣粘蛋白抗體英文全稱angiostatin英文簡(jiǎn)稱angiostatin檢測(cè)范圍1813nmol/L-100ng/mL

凋亡抑制因子2抗體英文全稱Pyr英文簡(jiǎn)稱Pyr檢測(cè)范圍1814nmol/L-200nmol/L

半胱氨酸雙加氧酶1抗體英文全稱phosphatidylinositol antibody 英文簡(jiǎn)稱PI-Ab檢測(cè)范圍1815nmol/L-20ng/mL

膠原蛋白11A2抗體英文全稱aPS-IgG英文簡(jiǎn)稱aPS-IgG檢測(cè)范圍1816nmol/L-

鈣粘蛋白6抗體英文全稱aPS-IgM英文簡(jiǎn)稱aPS-IgM檢測(cè)范圍1817nmol/L-

兔抗雞IgY抗體英文全稱Prothrombin-IgG英文簡(jiǎn)稱Prothrombin-IgG檢測(cè)范圍1818nmol/L-

20號(hào)染色體開放閱讀框128抗體英文全稱Prothrombi-IgM英文簡(jiǎn)稱Prothrombi-IGM檢測(cè)范圍1819nmol/L-

細(xì)胞色素P450ⅡE1抗體英文全稱Brucella-IgM英文簡(jiǎn)稱Brucella-IgM檢測(cè)范圍1820nmol/L-

CD8/CD8-β抗體英文全稱Brucella-IgA英文簡(jiǎn)稱Brucella-IgA檢測(cè)范圍1821nmol/L-

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶CABLES2抗體英文全稱B-cell leukemia;lymphoma 3英文簡(jiǎn)稱Bcl-3檢測(cè)范圍1822nmol/L-100ng/mL

B-淋巴細(xì)胞趨化因子抗體英文全稱Ephrin A1英文簡(jiǎn)稱EFNA1檢測(cè)范圍1823nmol/L-10ng/mL

細(xì)胞分裂周期蛋白23抗體英文全稱α-galactosidase A英文簡(jiǎn)稱αGALA檢測(cè)范圍1824nmol/L-200mU/mL

結(jié)腸和肝腫瘤高表達(dá)蛋白抗體英文全稱deacetylation英文簡(jiǎn)稱GL3檢測(cè)范圍1825nmol/L-80U/L

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基1抗體英文全稱Caveolin英文簡(jiǎn)稱Caveolin檢測(cè)范圍1826nmol/L-10000pg/mL

細(xì)胞角蛋白42英文全稱Leishimaria IgG antibody英文簡(jiǎn)稱Leishimaria IgG Ab檢測(cè)范圍1827nmol/L-

大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)100 ul

大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒CD9 (D8O1A) Rabbit mAb100 ul

大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒Phospho-PRAS40 (Thr246) (D4D2) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒Phospho-PRAS40 (Thr246) (D4D2) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠皮質(zhì)(Cortisol)ELISA試劑盒Calbindin (D1I4Q) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒Calbindin (D1I4Q) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒UCHL1 (D3T2E) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒UCHL1 (D3T2E) XP® Rabbit mAb100 ul
AMA大鼠抗單核細(xì)胞抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理磷化磷神經(jīng)膜抗體Dregeoside Aa1別名: Drebyssoside 2分子式: C49H78O17性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 南山藤；孕甾烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體Adynerigenin β-neritrioside別名: 分子式: C42H64O17性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 強(qiáng)心苷；甾苷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化磷神經(jīng)膜抗體nacissoside G別名: nacissimoside A分子式: C42H64O14性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 通光散；通關(guān)藤；孕甾烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

叉頭蛋白N1抗體11,12-Di-O-acetylnacigenin B別名: 分子式: C25H36O7性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 孕甾烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

磷化DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體Dehydroadynerigenin β-neritrioside別名: 分子式: C42H62O17性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 強(qiáng)心苷；甾苷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione別名: 分子式: C28H40O3性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗癌；麥角甾烷；中藥對(duì)照品；中藥標(biāo)準(zhǔn)品；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體Marsdenoside F別名: 分子式: C39H60O14性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 通光散；孕甾烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體nacissoside I別名: nacissimoside B分子式: C44H62O14性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 通關(guān)藤；孕甾烷；植物提取物；天然產(chǎn)物；天然產(chǎn)物庫(kù)
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)