當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T應(yīng)答元件結(jié)合蛋白1撫生ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
應(yīng)答元件結(jié)合蛋白1撫生ELISA試劑盒 | Ras-responsive element-binding protein 1 | FS-P66092 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
長壽相關(guān)因lASS5抗體C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌因抗原BICINE;N,N-二羥乙甘氨Dystonin蛋白(DST)ELISA試劑盒
長壽相關(guān)因lASS3抗體CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原BES sodium salt; N,N-二(2-羥乙)-2-氨乙磺鈉Dymeclin蛋白(DYM)ELISA試劑盒
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因1抗體CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原BES free acid; N,N-(2-羥乙)-2-氨乙磺Duffy血型趨化因子受體(DARC)ELISA試劑盒
長壽相關(guān)因lASS4抗體CGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原黃芪多糖(68%)DR1關(guān)聯(lián)蛋白1(DRAP1)ELISA試劑盒
RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原黃芪多糖(50%)DNA指導(dǎo)聚合酶γ1(POLγ1)ELISA試劑盒
RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗原黃芪多糖(30%)DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)ELISA試劑盒
內(nèi)皮脂肪酶抗體ChRM3 peptide 蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原Fmoc-D-4-氧氨DnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12(DNAJC12)ELISA試劑盒
淋巴抗原6G抗體CK18(Cytokeratin 18) 角蛋白18(多肽)3-奎寧環(huán)酮鹽鹽Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)ELISA試劑盒
富含亮氨膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體CK18 peptide 角蛋白18多肽抗原氟咪唑Discs大同源物3(DLG3)ELISA試劑盒
層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體CK18(Cytokeratin 18) 角蛋白18抗原(C端)氟咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒
唾液過氧化物酶LPO抗體CK14/17/42/10 peptide 角蛋白14抗原伊索拉定Dickkopf相關(guān)蛋白2(DKK2)ELISA試劑盒
溶菌酶抗體CK16(Cytokeratin 16) 角蛋白16抗原ADA單鈉鹽Dicer酶1(DICER1)ELISA試劑盒
溶菌酶抗體CK17(Cytokeratin 17) 角蛋白17抗原N-(乙酰氨)亞氨二乙二鈉鹽Diaphanous同源物1(DIAPH1)ELISA試劑盒
LAD1蛋白抗體CK19 角蛋白19多肽抗原ADA;N-(2-乙酰)-2-亞氨二乙Desmuslin蛋白(DMN)ELISA試劑盒
胸腺生成素LAP2抗體CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 角蛋白1/8/19抗原ACES;N-(乙酰氨)-2-氨乙烷磺Dermokine蛋白(DMKN)ELISA試劑盒
應(yīng)答元件結(jié)合蛋白1撫生ELISA試劑盒Anti-NFKB2 Antibody香菇拉丁屬名: Lentinula edodes
Anti-NFKB2 Antibody(PB0160)大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Anti-NFKBIA Antibody玫瑰擬層孔菌拉丁屬名: Fomitopsis rosea
Anti-NFKBIA Antibody(PB0303)黃赭色鏈霉菌用途: 產(chǎn)生激素和抗生素
Anti-NGF Antibody球孢白僵菌用途: 生物防治
Anti-NGF Antibody淡紫紫霉拉丁屬名: Purpureocillium lilacinum
Anti-NGF Antibody葛氏沙雷氏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-NFKBIB Antibody(PB0304)產(chǎn)黃青霉拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
Anti-NGF Antibody鴿痘病拉丁屬名: Pigeon pox virus
Anti-NGFR Antibody霍氏分支桿菌拉丁屬名: Mycobacterium hodleri
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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