當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>大鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TCsA大鼠環(huán)孢素AELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | CsA大鼠環(huán)孢素AELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Cyclosporine A, CsA Elisa Kit |
貨號 | FS-R64510 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
3號染色體開放閱讀框59抗體英文全稱Nuclear factor-kappa B P52英文簡稱NF-KB p52檢測范圍2164nmol/L-2000pg/ml
5號染色體開放閱讀框51抗體英文全稱Collagen alpha-1(XII) chain英文簡稱COL12A1檢測范圍2165nmol/L-800pg/mL
3號染色體開放閱讀框70抗體英文全稱glycosylated ferritin英文簡稱GF檢測范圍2166nmol/L-400ng/mL
鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體英文全稱anti-PL7-antibody英文簡稱PL7檢測范圍2167nmol/L-80ng/mL
1號染色體開放閱讀框74抗體英文全稱collagen alpha-2(VIII) chain英文簡稱COL8A2檢測范圍2168nmol/L-20ng/ml
補體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體英文全稱cell membrane associated DNA antibody英文簡稱cmDNA檢測范圍2169nmol/L-
1號染色體開放閱讀框93抗體英文全稱anti-centromere antibody英文簡稱ACA;CENP檢測范圍2170nmol/L-
1號染色體開放閱讀框94抗體英文全稱α-FodrinIgG;IgA英文簡稱α-FodrinIgG;IgA檢測范圍2171nmol/L-200ng/mL
1號染色體開放閱讀框96抗體英文全稱ABI gene family member 3英文簡稱ABI3檢測范圍2172nmol/L-8000pg/mL
1號染色體開放閱讀框41抗體英文全稱Tumor Necrosis Factor receptor γ英文簡稱TNFR-γ檢測范圍2173nmol/L-2000pg/mL
2號染色體開放閱讀框55抗體英文全稱ceramide antibody英文簡稱ceramide-Ab檢測范圍2174nmol/L-200ng/mL
2號染色體開放閱讀框57抗體英文全稱C-opeptide of type Ⅰ collagen英文簡稱ICTP檢測范圍2175nmol/L-800ng/mL
2號染色體開放閱讀框29抗體英文全稱Lysophosphatidic acid phosphatase type 6英文簡稱ACP6檢測范圍2176nmol/L-20ng/mL
3號染色體開放閱讀框21抗體英文全稱Interleukin 17α英文簡稱IL-17α檢測范圍2177nmol/L-32pg/mL
CD83抗體英文全稱Interleukin 17β英文簡稱IL-17β檢測范圍2178nmol/L-16pg/mL
17號染色體開放閱讀框59抗體英文全稱Interleukin 17γ英文簡稱IL-17γ檢測范圍2179nmol/L-32pg/mL
大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒PVR/CD155 (D3G7H) Rabbit mAb100 ul
大鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)ELISA試劑盒Phospho-Rpb1 CTD (Ser2/Ser5) (D1G3K) Rabbit mAb1 Kit
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒Griess Reagent Nitrite Measurement Kit100 ul
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Prolactin Receptor (D4A9) Rabbit mAb100 ul
兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒Mios (D12C6) Rabbit mAb100 ul
兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒 DDC (D6N8N) Rabbit mAb100 ul
兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒Kindlin-2 Antibody1 Kit
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒PTMScan® Symmetric Di-Methyl Arginine Motif [sdme-RG] Kit100 ul
CsA大鼠環(huán)孢素AELISA試劑盒實驗原理生長停滯特異性蛋白6抗體Zeylenone別名: 分子式: C21H18O7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
谷胱甘肽合成酶抗體1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose別名: 分子式: C31H38O18性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
血型糖蛋白δ抗體(6E,12E)-tradeca-6,12-diene-8,10-diyne-1,3-diol diaceta別名: 分子式: C18H22O4性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)亮氨拉鏈蛋白抗體1,5-Anhydroglucitol別名: 分子式: C6H12O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體Zeylenol別名: 分子式: C21H20O7性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G氨基丁受體δ/GABAA Rδ抗體Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoa別名: 分子式: C19H34O3性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G氨基丁受體γ1/GABAA Rγ1抗體3-O-(6'-O-Galloyl)-β-D-glucopyranosylmaltol別名: 分子式: C19H20O12性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化γ氨基丁γ2受體抗體Mumeose K別名: 分子式: C25H32O15性狀: Powder純度: 93.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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