當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIL-1α小鼠白介素1αELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | IL-1α小鼠白介素1αELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit |
貨號 | FS-M64426 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
葫蘆素E(標準品)Cucurbitacin18444-66-1
槲皮苷(標準品)Quercitrin 規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
槲皮素(標準品)Quercetin 規(guī)格:HPLC>98.0%,標準品
槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)Quercetin18016-58-5
槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標準品)Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside 規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
槲皮素Quercetin6151-25-3
糊精;白糊精Dextrin 規(guī)格:BR
糊精肽,人Amylin,human 規(guī)格:>95%,BR
虎掌草皂甙D(標準品)無 規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷(標準品)Polydatin 規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷Polydatin 規(guī)格:HPLC>97%,BR
琥珀;丁二(標準品)Succinic110-15-6
琥珀;丁二Succinic110-15-6
琥珀多西拉敏(標準品)Doxylamine562-10-7
琥珀多西拉敏-d5Doxylamine-d51216840-94-6
L硒代蛋標準品Human estrogen ELISA Kit純度:0.98
司來吉蘭標準品Human Estradiol ELISA Kit純度:0.995
司可標準品Human SOD ELISA Kit純度:0.998
東莨菪內(nèi)酯標準品Human High sensitivity Creactive protein ELISA Kit純度:0.993
東莨菪標準品Human iFABP ELISA Kit純度:0.999
沙奎拉韋相關物質(zhì)A標準品Laminin純度:0.998
甲磺沙奎拉韋標準品Human Laminin ELISA KIT純度:0.996
短葶山麥冬皂苷C Liriope Muscari Baily saponins C 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
麥冬皂苷D Ophiopogonin D 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃 (-) - clove phenol resin -4-O- beta -D- furan 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
木蘭花;唐松草 Magnoflorine; Tang Song potash 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
木蘭脂素 Magnolin 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
京尼平龍膽雙糖苷;京尼平-1-β-D-龍 Genipin gentian diglucoside; genipin -1- beta -D- Dragon 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
毛蘭素 Mao Lansu 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
纈草三酯;纈草素 Valerian three ester; valepotriate 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
甲基麥冬二氫高異黃A Methyl Ophiopogon two hydrogen high isoflavone A 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
甲基麥冬二氫高異黃B Methyl Ophiopogon two hydrogen high isoflavone B 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
去甲澤拉木醛;去甲澤拉木醇 Demethylzeylasteral; go armour Zeila alcohol 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
莪術烯 Curzerene 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
IL-1α小鼠白介素1αELISA試劑盒實驗原理DNA損傷結合蛋白1抗體Porcine DT (Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit
DNA損傷結合蛋白2抗體Porcine AGC (Aggrecan) ELISA Kit
CD299抗體Porcine CKLFSF6 (Chemokine Like Factor Superfamily 6) ELISA Kit
C型凝集素結構域家族4成員A抗體Porcine FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit
C型凝集素結構域家族6成員A抗體Porcine PCSK9 (Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9) ELISA Kit
B淋巴銜接分子DAPP1抗體Porcine LIF (Leukemia Inhibitory Factor) ELISA Kit
DNA酶1樣蛋白1抗體Porcine Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit
抗菌蛋白DCD抗體Porcine Rock-2 (Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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