ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
葫蘆素E（標(biāo)準(zhǔn)品）Cucurbitacin18444-66-1

槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品）Quercitrin  規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

槲皮素(標(biāo)準(zhǔn)品）Quercetin  規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Quercetin18016-58-5

槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Quercetin-7-O-β-D-glucopyranoside  規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

槲皮素Quercetin6151-25-3

糊精;白糊精Dextrin  規(guī)格：BR

糊精肽，人Amylin,human  規(guī)格：>95%,BR

虎掌草皂甙D（標(biāo)準(zhǔn)品）無(wú)  規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Polydatin  規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷Polydatin  規(guī)格：HPLC>97%,BR

琥珀；丁二(標(biāo)準(zhǔn)品)Succinic110-15-6

琥珀；丁二Succinic110-15-6

琥珀多西拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品)Doxylamine562-10-7

琥珀多西拉敏-d5Doxylamine-d51216840-94-6

L硒代蛋標(biāo)準(zhǔn)品Human estrogen ELISA Kit純度：0.98

司來(lái)吉蘭標(biāo)準(zhǔn)品Human Estradiol ELISA Kit純度：0.995

司可標(biāo)準(zhǔn)品Human SOD ELISA Kit純度：0.998

東莨菪內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品Human High sensitivity Creactive protein ELISA Kit純度：0.993

東莨菪標(biāo)準(zhǔn)品Human iFABP ELISA Kit純度：0.999

沙奎拉韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品Laminin純度：0.998

甲磺沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品Human Laminin ELISA KIT純度：0.996

短葶山麥冬皂苷C Liriope Muscari Baily saponins C 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

麥冬皂苷D Ophiopogonin D 規(guī)格：HPLC≥98% 10mg/支

(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-呋喃 (-) - clove phenol resin -4-O- beta -D- furan 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

木蘭花；唐松草 Magnoflorine; Tang Song potash 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

木蘭脂素 Magnolin 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

京尼平龍膽雙糖苷；京尼平-1-β-D-龍 Genipin gentian diglucoside; genipin -1- beta -D- Dragon 規(guī)格：HPLC≥98% 10mg/支

毛蘭素 Mao Lansu 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

纈草三酯;纈草素 Valerian three ester; valepotriate 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

甲基麥冬二氫高異黃A Methyl Ophiopogon two hydrogen high isoflavone A 規(guī)格：HPLC≥98% 10mg/支

甲基麥冬二氫高異黃B Methyl Ophiopogon two hydrogen high isoflavone B 規(guī)格：HPLC≥98% 10mg/支

去甲澤拉木醛；去甲澤拉木醇 Demethylzeylasteral; go armour Zeila alcohol 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支

莪術(shù)烯 Curzerene 規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支
IL-1α小鼠白介素1αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體Porcine DT (Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit

DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體Porcine AGC (Aggrecan) ELISA Kit

CD299抗體Porcine CKLFSF6 (Chemokine Like Factor Superfamily 6) ELISA Kit

C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體Porcine FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit

C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體Porcine PCSK9 (Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9) ELISA Kit

B淋巴銜接分子DAPP1抗體Porcine LIF (Leukemia Inhibitory Factor) ELISA Kit

DNA酶1樣蛋白1抗體Porcine Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit  

抗菌蛋白DCD抗體Porcine Rock-2 (Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)