當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIL-15小鼠白介素15ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | IL-15小鼠白介素15ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Interleukin 15, IL-15 Elisa Kit |
貨號 | FS-M64425 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
磷鎢負染色液(3%),100ml 進口/原裝 Trt-dT 規(guī)格:>98%,BR
磷鎢負染色液(5%),100ml 進口/原裝 Troxipide 規(guī)格:含量測定"
改良酚品紅染色液,100ml 進口/原裝Troxerutin 規(guī)格:HPLC法含量測定
固綠染色液(0.1%),100ml 進口/原裝 Trospium chloride 規(guī)格:>99%,EP6,BR
固綠染色液(0.5%),100ml 進口/原裝 Tropisetron hydrochloride 規(guī)格:HPLC>98%,標準品
基底膜六銀染色液,6*50ml 進口/原裝 Tropisetron hydrochloride 規(guī)格:>98%,BR
龍膽紫水溶液(0.5%),100ml 進口/原裝 Tropine 規(guī)格:供檢查用
龍膽紫水溶液(0.1%),100ml 進口/原裝 Tropicamide 規(guī)格:含量測定
結(jié)晶紫水溶液(0.5%),100ml 進口/原裝 Tropic acid 規(guī)格:>98%
L賴醋標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:LLysine Acetate
丹曲林相關(guān)物質(zhì)B標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
雌二相關(guān)物質(zhì)C標準品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
馬尿烏標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Methenamine Hippurate
馬來醋奮乃靜標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Acetophenazine Maleate
尿標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Urea
革標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Clorazepate Dipotassium CIV
西曲溴銨標準品 規(guī)格:1g 英文名稱:Cetrimonium Bromide
萘法唑相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Nefazodone Related Compound A
地標準品 規(guī)格:0.5ml 英文名稱:Desflurane
銀杏C15:1 Ginkgo acid C15:1 規(guī)格:20mg
桃葉珊瑚苷 Aucubin 規(guī)格:20mg
11-羰基-β-乙酰乳香 11- keto beta boswellic acid and acetyl 規(guī)格:20mg
二苯基庚烷A Two phenyl heptane A 規(guī)格:20mg
20(S)-原人參三醇 20 (S) - protopanaxatriol three alcohol 規(guī)格:20mg
羅漢果苷V Mogroside V 規(guī)格:20mg
(R,S)-告依春 (R, S) - goitrin 規(guī)格:20mg
派可林 Pipecolic acid 規(guī)格:20mg
薏苡仁油 Coix seed oil 規(guī)格:0.2ml
20(s)-人參皂苷Rh2 20 (s) - ginsenoside Rh2 規(guī)格:20mg
20(s)-原人參二醇 20 (s) - protopanaxadiol 規(guī)格:20mg
醋乙酯 Ethyl acetate 規(guī)格:1ml
IL-15小鼠白介素15ELISA試劑盒實驗原理命運決定因子DACH1抗體Porcine THAA (Thyroid Hormone Autoantibody) ELISA Kit
Dab2相互作用蛋白抗體Porcine ODC (Ornithine Decarboxylase) ELISA Kit
線粒體2,4-雙烯酰輔酶A還原酶1抗體Porcine Ntn1 (Netrin 1) ELISA Kit
動力蛋白激活蛋白亞基3抗體Porcine GR (Glutathione Reductase) ELISA Kit
動力蛋白激活蛋白6抗體Porcine PLCγ1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit
脫酶2抗體Porcine CYPB (Cyclophilin B) ELISA Kit
磷化DNA依賴性蛋白激酶抗體Porcine ME20M (Melanoma Associated ME20) ELISA Kit
防御素α4抗體Porcine ANG II R2/AGTR2 (Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit
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