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貨號 | AXB9790 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
產(chǎn)品名稱 | GH3(垂體瘤細(xì)胞) | 貨號 | AXB9790 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | GH3:GH3 |
分類 | 其它系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
別稱 | GH 3 |
種屬 | 大鼠 |
年齡(性別) | 7月齡 |
組織來源 | 垂體 |
生長特性 | 半貼半懸 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | GH3細(xì)胞是由Tashjian·A·H等人于1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細(xì)胞不是直接來源于GH1細(xì)胞的克隆,而是從原代培養(yǎng)的GH1細(xì)胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮細(xì)胞樣的GH3細(xì)胞比GH1細(xì)胞分泌更高水平的生長激素,也可產(chǎn)生催乳素。對調(diào)控GH3細(xì)胞分泌蛋白類激素的研究表明,氫化可以刺激GH3細(xì)胞生長激素的分泌、抑制催乳素的產(chǎn)生。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | Ham's F-12K+15% HS+2.5% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時(shí)間 | ~60-90小時(shí) |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Centaurin α1抗體 英文名;Centaurin alpha 1外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體 英文名;Myelin Protein Zero
CENTB2蛋白抗體 英文名;Centaurin beta 2外周髓鞘蛋白-22抗體 英文名;PMP22
CENTD1蛋白抗體 英文名;CENTD1外周髓鞘蛋白-22重組兔單克隆抗體 英文名;PMP22
CENTG3蛋白抗體 英文名;CENTG3完整膜蛋白E25A抗體 英文名;ITM2A
CERD4蛋白抗體 英文名;CERD4烷基甘油酮磷酸合酶抗體 英文名;AGPS
cereblon蛋白抗體 英文名;CRBN晚期包膜蛋白1抗體 英文名;LCE1A
Cervical cancer oncogene 3/宮頸癌原癌基因3抗體 英文名;FUNDC2晚期包膜蛋白2B抗體 英文名;LCE2B
CES1P1蛋白抗體 英文名;CES1P1晚期角質(zhì)化包膜蛋白抗體 英文名;LCE6A
Cezanne蛋白抗體 英文名;Cezanne晚期糖基化終產(chǎn)物受體1抗體 英文名;DDOST
c-fos單克隆抗體 英文名;c-fos晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 英文名;AGEs
c-fos抗體 英文名;c-fos晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 英文名;RAGE
GH3(垂體瘤細(xì)胞)c-fos重組兔單克隆抗體 英文名;c-Fos網(wǎng)蛋白抗體 英文名;Plectin
CGG結(jié)合蛋白1抗體 英文名;CGGBP1網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 英文名;Clathrin heavy chain
cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 英文名;cGKI微管蛋白beta 2單克隆抗體 英文名;beta II Tubulin / Tubulin beta 2
cGMP依賴性蛋白激酶2抗體 英文名;CGK2微管蛋白α 1A/1B(內(nèi)參)抗體 英文名;Tubulin alpha (Loading Control)
charlevoix-saguenay型痙攣性共濟(jì)失調(diào)Sacsin蛋白抗體 英文名;Sacsin微管蛋白α/Tubulin α(內(nèi)參)抗體 英文名;Tubulin-alpha (Loading Control)
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
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