當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TMDA大鼠丙二醛ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | MDA大鼠丙二醛ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Rat malondialchehyche, MDA Elisa Kit |
貨號 | FS-R64515 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
4號染色體開放閱讀框19抗體英文全稱Cytoskeleton associated protein 4英文簡稱CKAP4檢測范圍2244nmol/L-40ng/mL
4號染色體開放閱讀框27抗體英文全稱factor B英文簡稱BF檢測范圍2245nmol/L-80ng/ml
4號染色體開放閱讀框22抗體英文全稱factor H英文簡稱HF檢測范圍2246nmol/L-100ng/ml
4號染色體開放閱讀框14抗體英文全稱ntercellular adhesion molecule 2英文簡稱ICAM-2;CD102檢測范圍2247nmol/L-100ng/ml
磷酸化C端結(jié)合蛋白1抗體英文全稱Protein cereblon英文簡稱CRBN檢測范圍2248nmol/L-2000pg/mL
脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體英文全稱actin binding protein英文簡稱ABP檢測范圍2249nmol/L-40ng/mL
整合素αM抗體Integrin αM英文全稱Cannabinoid Receptor I英文簡稱CB1檢測范圍2250nmol/L-20ng/ml
軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細(xì)胞抗體英文全稱Der p1 IgE英文簡稱Der p1 IgE檢測范圍2251nmol/L-200ng/mL
軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體(少突膠質(zhì)細(xì)胞)英文全稱fibronection related antigen英文簡稱FRA檢測范圍2252nmol/L-800pg/mL
鈣粘附分子10抗體英文全稱activated coagulation factor Ⅱ英文簡稱FⅡa檢測范圍2253nmol/L-20ng/mL
9號染色體開放閱讀框72抗體英文全稱activated coagulation factor Ⅸ英文簡稱FⅨa檢測范圍2254nmol/L-4000pg/mL
γ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體英文全稱RBCS英文簡稱RBCS檢測范圍2255nmol/L-10ng/mL
δ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)素/δ鏈接素(δ-catenin)抗體英文全稱laminin α4英文簡稱LAMα4檢測范圍2256nmol/L-40ng/ml
大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體英文全稱basic fibroblast growth factor 4英文簡稱bFGF-4檢測范圍2257nmol/L-2000pg/mL
R Cadherin/CDH4英文全稱citron kinase英文簡稱citron檢測范圍2258nmol/L-4000pg/mL
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體英文全稱Keratin1英文簡稱KRT1檢測范圍2259nmol/L-1000pg/mL
兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒IBMX100 ul
兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb10 mg
兔子視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒Camptothecin100 ul
兔腎素(Renin)ELISA試劑盒Phospho-GKAP (Ser346) Antibody100 ul
兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 VAMP3 Antibody100 ul
兔吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒MED26 Antibody100 ul
兔凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒PKCθ (E1I7Y) Rabbit mAb100 ul
兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒STING (D2P2F) Rabbit mAb100 ul
MDA大鼠丙二醛ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理蛋白激酶GCN2蛋白抗體15-Nonacosanol別名: 分子式: C29H60O性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白偶聯(lián)受體GPR78蛋白抗體Aflatoxin B1別名: AFB1; 素B1分子式: C17H12O6性狀: Yellow powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 致癌物;對照品;標(biāo)準(zhǔn)品;微生物代謝產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體Primeverose別名: 分子式: C11H20O10性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl esr別名: Methyl 4,5-di-O-caffeoylquina分子式: C26H26O12性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗氧化;莽草;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化生長因子受體結(jié)合蛋白10抗體Methyl chlorogena別名: Chlorogenic acid methyl esr分子式: C17H20O9性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 莽草;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化糖原合酶激酶3β抗體Polyhydroxybutyra別名: PHB分子式: C12H20O7性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化蛋白激酶GCN2蛋白抗體n-Tritriacontan-16,18-dione別名: 分子式: C33H64O2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化蛋白激酶GCN2蛋白抗體n-Butyl-β-D-fructopyranoside別名: 分子式: C10H20O6性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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