當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>小鼠ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TIL-10小鼠白介素10ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | IL-10小鼠白介素10ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse interleukin 10, IL-10 Elisa Kit |
貨號 | FS-M64423 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
(植物培養(yǎng)級)Chloramphenicol 規(guī)格:>99%,用于植物培養(yǎng)
Chloramphenicol 規(guī)格:>99%,BR
美扎(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlormezanone 規(guī)格:UV法溶出度檢查
米帕明N氧化物Clomipramine14171-67-6
尼達(dá)明Lonidamine 規(guī)格:>99%,BR
諾昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)Lornoxicam 規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
諾昔康-d4Lornoxicam-d4 規(guī)格:美國進口
諾昔康Lornoxicam 規(guī)格:>99%
普噻噸(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlorprothixene 規(guī)格:檢查
普噻噸Chlorprothixene 規(guī)格:>98%,BR
前列醇鈉(DL型)DL-Cloprostenol55028-72-3
前列醇鈉(D型)D-Cloprostenol62561-03-9
冉(>98.0%(HPLC)(T))Chloranilic87-88-7
噻嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlorothiazide 規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用
舒隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Clorsulon 規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
L精標(biāo)準(zhǔn)品Rat Interleukin23 ELISA Kit純度:0.98
L阿拉伯糖標(biāo)準(zhǔn)品Rat Interleukin23 ELISA Kit純度:0.99
蘭素拉唑標(biāo)準(zhǔn)品Rat Gammaaminobutyric acid ELISA Kit純度:0.994
羊毛脂標(biāo)準(zhǔn)品Rat Gammaaminobutyric acid ELISA Kit純度:0.62
羊毛脂標(biāo)準(zhǔn)品Rat βThromboglobulin ELISA Kit純度:0.985
拉莫三嗪標(biāo)準(zhǔn)品Rat βThromboglobulin ELISA Kit純度:0.97
拉米夫定標(biāo)準(zhǔn)品Rat BetaEndorphin ELISA Kit純度:0.995
戈米辛J Gomisin J 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支
槐角苷 Sophoricoside 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
Xanthine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
2-金剛烷醇 2- adamantane alcohol 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
5-甲基-7-甲氧基異黃 5- methyl -7- methoxy isoflavone 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
4-甲氧基楊 4- methoxy salicylic acid 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
肌苷 Inosine 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
檗(黃連素) Berberine (berberine) 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
蒼術(shù) Atractylon 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
東莨宕(東莨菪) Scopolamine (hyoscine) 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
異型南五味子丁素 Heterotypic Kadsura Ding Su 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
絡(luò)石苷(絡(luò)石藤苷) Luo Shigan (Trachelospermum jasminoides glycoside) 規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支
IL-10小鼠白介素10ELISA試劑盒實驗原理DeltaD抗體Porcine MAdCAM1 (Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit
神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體Porcine SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit
對接蛋白3抗體Porcine ETRB (Endothelin Receptor B) ELISA Kit
DCN1樣蛋白2抗體Porcine IL-11 (Interleukin 11) ELISA Kit
熱休克蛋白J2抗體Porcine LAB7-2/CD86 (B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2) ELISA Kit
雙特異性酪氨磷化調(diào)節(jié)激酶1B抗體Porcine MYBPC3 (Myosin Binding Protein C, Cardiac) ELISA Kit
二?;视图っ?/font>5抗體Porcine Surv (Survivin) ELISA Kit
DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體Porcine UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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