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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TEMA人上皮膜抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | EMA人上皮膜抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Epithelial membrane antigen, EMA Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H64118 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
水中化物速測(cè)盒 規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng) Ceftiofur Sodium
水中尿素速測(cè)盒 規(guī)格:含量測(cè)定 Ceftiofur Sodium
水中錳速測(cè)盒 規(guī)格:>97%,分子生物學(xué)級(jí) Cytidine-5'-triphosphate(CTP) disodium salt dihydrate
水中六價(jià)鉻速測(cè)盒 規(guī)格:>99%,BR Voglibose
水中鹽速測(cè)盒 規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Voglibose
水中化物速測(cè)盒 規(guī)格:>97% Brivanib alaninate
水中甲醛速測(cè)盒 規(guī)格:>96%,* Gentiobiose
水中揮發(fā)酚速測(cè)盒 規(guī)格:>98% Silodosin
水質(zhì)總硬度速測(cè)盒 規(guī)格:>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品 Silodosin
水中化物速測(cè)盒 規(guī)格:>99%,BR Brimonidine tartrate
水中氨氮速測(cè)盒 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Brimonidine tartrate
水中總鐵速測(cè)盒 規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng) Imatinib
水質(zhì)色度速測(cè)盒 規(guī)格:>98% Aliskiren Inter-5
水質(zhì)耗氧量(COD)速測(cè)盒 規(guī)格:>98.5% GHKcu/Growth-modulating peptide
ST-1/LAS 陰離子合成洗滌劑檢測(cè)儀 規(guī)格:>98%,BR Triamterene
Isobutyrylshikonin1,2-萘二甲腈(>98.0%(GC)) 分子式:C28H40O6 純度:98.0%
Ipecoside1,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲腈(>98.0%(HPLC)(T)) 分子式:C15H20O4 純度:97.5%
Bruceantin1-氮雜-15-冠-5-醚(>98.0%(T)) 分子式:C15H18O2 性狀:Cryst. 純度:98.5%
Camphor1-氮雜-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)(T)) 分子式:C15H20O2 性狀:Cryst. 純度:95.0%
Dehydrocavidine1-氮雜-12-冠4-醚(>98.0%(T)) 分子式:C15H24O 性狀:Oil 純度:85.0%
Onjisaponin B4'-乙酰苯并-15-冠-5-醚(>95.0%(GC)) 分子式:C15H20O3 純度:95.5%
Perillaldehyde苯并-15-冠5-醚(>98.0%(GC)) 分子式:C15H26O2 性狀:Cryst. 純度:98.0%
Anemarsaponin B苯并-12-冠4-醚(>98.0%(GC)) 分子式:C19H32O8 純度:98.0%
Chikusetsu saponin Ⅳa苯并-18-冠6-醚(>96.0%(GC)) 分子式:C15H20O3 性狀:Oily solid 純度:%
乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: HSPG2 ELISA Kit
基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAKit 96T/48T
鴨白介素1(IL-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Duck Ierleukin 1,IL-1 ELISA Kit
CLIAKitforp2(Humanmyelinprotein2)ELISAKit神經(jīng)髓鞘蛋白規(guī)格:48T/96T
四環(huán)素溶液10毫克/毫升
ELISAKitLTB4白三烯B4規(guī)格:48T/96T
C肽(C-Peptide)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Glycated hemoglobin A1c,A1c ELISA Kit
前列H2(PGH2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: PGH2 ELISA Kit
RabbitHeatShockProtein90,HSP-90酶聯(lián)免疫試劑盒兔熱休克蛋白90(HSP-90)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-perinuclearfactor,APF酶聯(lián)免疫試劑盒抗核周因子抗體(APF)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancellularfibronectin,cFnELISAKit纖維連接蛋白(cFn)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
EMA人上皮膜抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理IAA/FITC 熒光素標(biāo)記吲哚-3-乙抗體/植物生長(zhǎng)素單克隆抗體IgG陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白1抗體5-溴-2-硝基苯Rat TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit
IASPP/FITC 熒光素標(biāo)IASPP蛋白抗體IgG1號(hào)染色體開放閱讀框222抗體1-(2-)-2-吡咯烷Rat TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit
Iba-1/FITC 熒光素標(biāo)記離子鈣接頭蛋白抗體IgG2號(hào)染色體開放閱讀框15抗體1-(2-)-2-吡咯烷Rat SERP1 (Stress-associated Endoplasmic Reticulum Protein 1) ELISA Kit
ICAD/FITC 熒光素標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核酶抑制劑抗體IgG骨架相關(guān)蛋白4抗體2-溴-5-苯Rat TLR4 (Toll-Like Receptor 4) ELISA Kit
ICAM-1(CD54)/FITC 熒光素標(biāo)記間粘附分子-1抗體IgG肌肽二肽酶1抗體2-溴-5-苯Rat TLR9 (Toll-Like Receptor 9) ELISA Kit
CD54/ICAM-1/Biotin 生物素標(biāo)記間粘附分子-1抗體IgG性線粒體肌激酶抗體4-甲硫基芐Rat c-myc (c-myc Oncogene Product) ELISA Kit
ICAM-3/CD50/FITC 熒光素標(biāo)記間粘附分子-3抗體IgG碳酐酶相關(guān)蛋白8抗體4-甲硫基芐Rat SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit
Icos/CD278/FITC 熒光素標(biāo)記誘導(dǎo)協(xié)同激分子CD278抗體IgG鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體4,4′-雙[(4-溴苯基)苯氨基]聯(lián)苯Rat 5-LO (Arachidonate 5-Lipoxygenase) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
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