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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96Tgelson人凝膠原蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | gelson人凝膠原蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human gelson Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H64417 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
癌易感基因2相互作用蛋白抗體英文全稱Tyrosine protein kinase receptor A4英文簡稱EphA4 檢測(cè)范圍:2751nmol/L-40ng/mL
癌易感基因2相關(guān)蛋白抗體英文全稱AMCA英文簡稱AMCA 檢測(cè)范圍:923nmol/L-80IU/ml
癌易感基因2抗體英文全稱DR-70TM英文簡稱DR-70TM 檢測(cè)范圍:1110nmol/L-200U/ml
癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體英文全稱Prothrombin 20210A英文簡稱P20210A 檢測(cè)范圍:1102nmol/L-8U/ml
癌易感基因1抗體英文全稱BP230-Ab英文簡稱BP230-Ab 檢測(cè)范圍:1109nmol/L-80U/L
癌抑制基因Protor1抗體英文全稱decorin英文簡稱DCN 檢測(cè)范圍:7298nmol/L-80ng/mL
癌抑癌蛋白抗體英文全稱ITG αVβ5英文簡稱ITG αVβ5 檢測(cè)范圍:948nmol/L-100ng/ml
癌相關(guān)抗原抗體英文全稱Hypersensitive troponin I英文簡稱hs-TnⅠ 檢測(cè)范圍:1526nmol/L-800pg/mL
Lysineacetate 規(guī)格:>99%,BR 原癌基因FRAT1抗體
L-Cystinedimethylesterdihydrochloride 規(guī)格:>97%,BR 膽汁受體抗體
GSK-2636771 規(guī)格:>97%,PI3Kβ選擇性抑制劑 FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子6抗體
N-Cbz-L-threonineBenzylEster 規(guī)格:0.98 Fyn結(jié)合蛋白抗體
(+)-2-Methyl-L-serine 規(guī)格:0.99 鋅指蛋白FYCO1抗體
3,3-Diphenyl-L-alanine 規(guī)格:0.98 FYTTD1蛋白抗體
α-Methyl-L-phenylalanine 規(guī)格:98%,BR,一水物 卷曲蛋白3抗體
L-Asparticaciddimethylesterhydrochloride 規(guī)格:>98%,BR 分裂周期樣蛋白20抗體
L-Cysteinemethylesterhydrochloride 規(guī)格:>98%,BR 磷化脂肪型脂肪結(jié)合蛋白
賴氨匹林 Lysine acetylsalicylate 規(guī)格:100mg
羥喜樹 Hydroxy camptothecin 規(guī)格:50mg
異丙安替比林 Propyphenazone 規(guī)格:200mg
異丙托溴銨 Ipratropium bromide 規(guī)格:100mg
硝鉀 Potassium nitrate 規(guī)格:100mg
鹽阿米替林 Amitriptyline hydrochloride 規(guī)格:100mg
雙肼屈嗪 Dihydralazine sulfate 規(guī)格:100mg
鹽西汀 Fluoxetine hydrochloride 規(guī)格:50mg
甲硝唑雜質(zhì)A(2-甲基-5-硝基咪唑) Metronidazole impurity A (2- methyl -5- nitro imidazole) 規(guī)格:50mg
熒光素鈉 Fluorescein sodium 規(guī)格:100mg
鹽依匹斯汀 Epinastine hydrochloride 規(guī)格:100mg
苯酚 Phenol 規(guī)格:100mg
gelson人凝膠原蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理酶動(dòng)力蛋白3抗體Porcine IAA (Insulin Autoantibody) ELISA Kit
δ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)素/δ鏈接素(δ-catenin)抗體Porcine PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit
胞漿接頭蛋白Dok6抗體Porcine PKCβ1 (Protein Kinase C Beta 1) ELISA Kit
胞漿接頭蛋白Dok5抗體Porcine MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit
癌中心體相關(guān)蛋白抗體Porcine ACTN2 (Actinin Alpha 2) ELISA Kit
DCAF13蛋白抗體Porcine IL-5 (Interleukin 5) ELISA Kit
原鈣粘蛋白16抗體Porcine GSTα1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit
雌激素受體相關(guān)蛋白α抗體Porcine LMP7/PSMB9 (Low Molecular-weight Protein/proteasome Beta-type Subunit) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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